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【中图分类号】R446 【文献标识码】B 【DOI】10.12332/j.issn.2095-6525.2020.11.075
寄生虫侵入到宿主之后，会在宿主的体内形成多种有害作用，其中涵盖了机械性损伤、掠夺营养、毒性作用以及继发感染等，严重影响了人体的健康。很多的寄生虫生活史中卵囊、虫卵或者是幼虫会随着粪便排出体外，通过粪便进行寄生虫检查，能够看其是否感染寄生虫及其寄生虫感染种类。病原学检查属于诊断寄生虫成虫或者是虫卵的重要实验手段，并且检查方法有许多。基于此，本文主要介绍目前比较常用的肠道寄生虫粪便病原学检查方法，希望能够为大家提供一些参考。
1 什么是肠道寄生虫病？
寄生虫在人体肠道内寄生而产生的疾病，都被称之为肠道寄生虫病。常见种类有蠕虫类以及原虫类，其中涵盖了钩虫、蛲虫、鞭虫、蛔虫、阿米巴、绦虫等。肠道中的寄生虫种类较多，并且在人体寄生的过程十分复杂，所形成的病变并不是仅限于肠道。根据感染寄生虫的种类和部位以及人體宿主的免疫状况，临床症状以及体征都存在着一定差异。
2 粪便标本采集的注意事项
粪便标本应当新鲜，并且送检的时间不要超过2小时，特别是要检查运动的滋养体，比如鞭毛虫、阿米巴以及纤毛虫等，必须要在粪便取材后的半小时之内进行检查，或者是将粪便标本保存在温度为35-37℃环境中待检。同时，装着粪便的容器应当保持着无水、干燥、洁净、无尿液、无粉尘的状态，且不要遭受到泥土以及药物的污染，并且最好使用加盖的便杯。容器外还需要贴好标签，标签上应有受检人员的姓名、受检目的以及日期等内容。粪便采集的量通常为5到10g，也就是拇指末节大小。若要求做粪便自然沉淀或者是血吸虫毛蚴孵化，这时受检的粪便量不能少于30g。如果需要检查蠕虫的成虫时，需要检验病人24小时的粪便。粪便检查时应关注其颜色、性状，若有粘液或者是脓血，需要优先选择这些部分，否则要取不同部位的粪便多点取样。
3 肠道寄生虫粪便的病原学检查方法
3.1直接涂片法
此种方法适用于检查原虫的包囊、滋养体以及蠕虫的虫卵。并且，此种检查方法十分简便，操作起来也十分简单。但是，其也存在着一定的劣势，由于取材较少，很容易发生漏检的情况。因此，可以采取连续涂片三张检查的方式，提升检查率。
生理盐水直接涂片主要是为了检验蠕虫卵以及原虫滋养体，具体操作为：在载破片中滴入生理盐水一到两滴，并取出米粒大小般的粪便，将其在生理盐水中均匀摊开，涂成薄粪膜。这一操作完成之后，将粗粪渣剔除，覆盖好盖膜片，在镜下完成镜检。而碘液染色涂片主要是为了检测原虫包囊，具体操作方法如下：用碘液替代生理盐水滴在载玻片上，并使用竹签取出米粒大小的粪便，将其放入碘液中，调制均匀之后加上盖玻片进行镜检。也可以先制备生理盐水涂片，加上盖玻片，最后在盖玻片的一侧边缘滴入一滴碘液，让其可以渗透到生理盐水涂片上，然后进行镜检。
3.2定量透明法
此种方法适用于粪便中各种蠕虫卵的计数与检查。通过对虫卵的计数，能够基本评估出寄生虫体的负荷，进而掌握感染的密度，有助于指导药物治疗的开展，也能够为评估疗效提供一定的参考。定量透明法的具体操作步骤如下：使用定量板，定量板大小为40mm×30mm×1.37mm，模孔为长圆孔，其大小在8mm×4mm，两端为半圆形，孔内能够容纳粪样41.7mg。把定量板放在载玻片上，使用金属筛盖在粪便上，并从筛网上刮取粪便，用刮取的粪便将模孔填满。完成这一步骤之后，将定量板掀起，载玻片上会留下一个形状为长条形粪样，这时将浸透的甘油—孔雀绿玻璃纸覆盖到粪样上，并用橡皮塞轻轻的加压，让粪样展平成椭圆形，等待一小时到两小时粪便成透明状之后进行镜检计数。所得的虫卵数需要乘以24倍，再乘以粪便性状系数（成形便1，半成形便为1.5，软湿便为2，粥样便为3，水泻便为4），简单来讲就是每克粪便虫卵数。
3.3自然沉淀法
此种方式适用于蠕虫卵、球虫卵囊以及原虫包囊的收集。蠕虫卵以及原虫包囊对比水来说其比重较大，在水中十分容易沉淀，进而达到虫卵聚集的效果，提高检出率。
3.4饱和盐水浮聚法
此种方法适用于各种蠕虫卵的检查，特别是检查钩虫卵效果十分的好，也能够用其检查带绦虫卵以及微小膜壳绦虫卵，适合用于原虫包囊以及吸虫卵的检查。
3.5钩蚴培养法
此种检查方法用于钩虫卵的检查。钩虫卵只有在适应的温度以及湿度环境中，才能够得到快速、良好的发育，从而孵化出幼虫，只需要用放大镜或者是肉眼进行观察。阳性检出率会比粪便直接涂片高7.2倍，并且大于饱和盐水浮聚法。通过此种方式培养出的丝状蚴可以用于虫种鉴定。
3.6毛蚴孵化法
此种检查方式属于血吸虫卵的专用检查方式，主要是根据血吸虫卵中的毛蚴，让其处于温度适宜的清水中，进而使其能够在短时间内进行孵化而设计出的一种孵化手段。
3.7幼虫分离法
此种方法主要用于在粪便中寻找到蠕虫的幼虫。贝尔曼装置是由一个较大的玻璃漏斗以及它周围的竖立成环形的支撑结构所组成的。漏斗下面连接着乳胶橡皮管，而管子里面有塞子。漏斗中需要装置好一个金属筛片，进而起到样品支撑的作用。在操作过程中，需要让其处于样品1到3厘米水平上，倒满约30℃的水，并将纱布铺设到拥有支撑的筛片上，同时放入5到15g的粪便残渣，确保其能够完全被温水所覆盖。等待一夜之后，拿出一块载玻片，并把载玻片放到橡皮管的下面，将塞子打开使里面的液体能够流到载玻片的上面，最终将盖玻片盖好，之后在显微镜下面进行幼虫的检查。
3.8幼虫培养法
拿出一些新鲜且易碎的粪便，将其放到培养皿中堆砌成半球状，让其顶部高出培养皿，接下来在边缘处加入少许的水。所用粪便不能过于干燥，稀便也不用额外进行加水。为了让培养皿与粪便能够接触的更好，需要在上面盖上盖子，并将其放到温度为25到30℃的培养箱中。放置过后，每天需要对粪便进行观察，看其是否干燥，并让其保持在较为合适的湿度，加水展开定期培养。待7到15天左右，第三期幼虫便会产生，它们会从粪便中爬出，这一阶段所有的幼虫基本都已经到达了感染期，幼虫会爬到培养皿的周围或者是盖子上，此时可以使用吸管吸入一些生理盐水将幼虫冲洗下来，并滴在载玻片上，覆盖好盖玻片，最终完成镜检。
寄生虫侵入到宿主之后，会在宿主的体内形成多种有害作用，其中涵盖了机械性损伤、掠夺营养、毒性作用以及继发感染等，严重影响了人体的健康。很多的寄生虫生活史中卵囊、虫卵或者是幼虫会随着粪便排出体外，通过粪便进行寄生虫检查，能够看其是否感染寄生虫及其寄生虫感染种类。病原学检查属于诊断寄生虫成虫或者是虫卵的重要实验手段，并且检查方法有许多。基于此，本文主要介绍目前比较常用的肠道寄生虫粪便病原学检查方法，希望能够为大家提供一些参考。
1 什么是肠道寄生虫病？
寄生虫在人体肠道内寄生而产生的疾病，都被称之为肠道寄生虫病。常见种类有蠕虫类以及原虫类，其中涵盖了钩虫、蛲虫、鞭虫、蛔虫、阿米巴、绦虫等。肠道中的寄生虫种类较多，并且在人体寄生的过程十分复杂，所形成的病变并不是仅限于肠道。根据感染寄生虫的种类和部位以及人體宿主的免疫状况，临床症状以及体征都存在着一定差异。
2 粪便标本采集的注意事项
粪便标本应当新鲜，并且送检的时间不要超过2小时，特别是要检查运动的滋养体，比如鞭毛虫、阿米巴以及纤毛虫等，必须要在粪便取材后的半小时之内进行检查，或者是将粪便标本保存在温度为35-37℃环境中待检。同时，装着粪便的容器应当保持着无水、干燥、洁净、无尿液、无粉尘的状态，且不要遭受到泥土以及药物的污染，并且最好使用加盖的便杯。容器外还需要贴好标签，标签上应有受检人员的姓名、受检目的以及日期等内容。粪便采集的量通常为5到10g，也就是拇指末节大小。若要求做粪便自然沉淀或者是血吸虫毛蚴孵化，这时受检的粪便量不能少于30g。如果需要检查蠕虫的成虫时，需要检验病人24小时的粪便。粪便检查时应关注其颜色、性状，若有粘液或者是脓血，需要优先选择这些部分，否则要取不同部位的粪便多点取样。
3 肠道寄生虫粪便的病原学检查方法
3.1直接涂片法
此种方法适用于检查原虫的包囊、滋养体以及蠕虫的虫卵。并且，此种检查方法十分简便，操作起来也十分简单。但是，其也存在着一定的劣势，由于取材较少，很容易发生漏检的情况。因此，可以采取连续涂片三张检查的方式，提升检查率。
生理盐水直接涂片主要是为了检验蠕虫卵以及原虫滋养体，具体操作为：在载破片中滴入生理盐水一到两滴，并取出米粒大小般的粪便，将其在生理盐水中均匀摊开，涂成薄粪膜。这一操作完成之后，将粗粪渣剔除，覆盖好盖膜片，在镜下完成镜检。而碘液染色涂片主要是为了检测原虫包囊，具体操作方法如下：用碘液替代生理盐水滴在载玻片上，并使用竹签取出米粒大小的粪便，将其放入碘液中，调制均匀之后加上盖玻片进行镜检。也可以先制备生理盐水涂片，加上盖玻片，最后在盖玻片的一侧边缘滴入一滴碘液，让其可以渗透到生理盐水涂片上，然后进行镜检。
3.2定量透明法
此种方法适用于粪便中各种蠕虫卵的计数与检查。通过对虫卵的计数，能够基本评估出寄生虫体的负荷，进而掌握感染的密度，有助于指导药物治疗的开展，也能够为评估疗效提供一定的参考。定量透明法的具体操作步骤如下：使用定量板，定量板大小为40mm×30mm×1.37mm，模孔为长圆孔，其大小在8mm×4mm，两端为半圆形，孔内能够容纳粪样41.7mg。把定量板放在载玻片上，使用金属筛盖在粪便上，并从筛网上刮取粪便，用刮取的粪便将模孔填满。完成这一步骤之后，将定量板掀起，载玻片上会留下一个形状为长条形粪样，这时将浸透的甘油—孔雀绿玻璃纸覆盖到粪样上，并用橡皮塞轻轻的加压，让粪样展平成椭圆形，等待一小时到两小时粪便成透明状之后进行镜检计数。所得的虫卵数需要乘以24倍，再乘以粪便性状系数（成形便1，半成形便为1.5，软湿便为2，粥样便为3，水泻便为4），简单来讲就是每克粪便虫卵数。
3.3自然沉淀法
此种方式适用于蠕虫卵、球虫卵囊以及原虫包囊的收集。蠕虫卵以及原虫包囊对比水来说其比重较大，在水中十分容易沉淀，进而达到虫卵聚集的效果，提高检出率。
3.4饱和盐水浮聚法
此种方法适用于各种蠕虫卵的检查，特别是检查钩虫卵效果十分的好，也能够用其检查带绦虫卵以及微小膜壳绦虫卵，适合用于原虫包囊以及吸虫卵的检查。
3.5钩蚴培养法
此种检查方法用于钩虫卵的检查。钩虫卵只有在适应的温度以及湿度环境中，才能够得到快速、良好的发育，从而孵化出幼虫，只需要用放大镜或者是肉眼进行观察。阳性检出率会比粪便直接涂片高7.2倍，并且大于饱和盐水浮聚法。通过此种方式培养出的丝状蚴可以用于虫种鉴定。
3.6毛蚴孵化法
此种检查方式属于血吸虫卵的专用检查方式，主要是根据血吸虫卵中的毛蚴，让其处于温度适宜的清水中，进而使其能够在短时间内进行孵化而设计出的一种孵化手段。
3.7幼虫分离法
此种方法主要用于在粪便中寻找到蠕虫的幼虫。贝尔曼装置是由一个较大的玻璃漏斗以及它周围的竖立成环形的支撑结构所组成的。漏斗下面连接着乳胶橡皮管，而管子里面有塞子。漏斗中需要装置好一个金属筛片，进而起到样品支撑的作用。在操作过程中，需要让其处于样品1到3厘米水平上，倒满约30℃的水，并将纱布铺设到拥有支撑的筛片上，同时放入5到15g的粪便残渣，确保其能够完全被温水所覆盖。等待一夜之后，拿出一块载玻片，并把载玻片放到橡皮管的下面，将塞子打开使里面的液体能够流到载玻片的上面，最终将盖玻片盖好，之后在显微镜下面进行幼虫的检查。
3.8幼虫培养法
拿出一些新鲜且易碎的粪便，将其放到培养皿中堆砌成半球状，让其顶部高出培养皿，接下来在边缘处加入少许的水。所用粪便不能过于干燥，稀便也不用额外进行加水。为了让培养皿与粪便能够接触的更好，需要在上面盖上盖子，并将其放到温度为25到30℃的培养箱中。放置过后，每天需要对粪便进行观察，看其是否干燥，并让其保持在较为合适的湿度，加水展开定期培养。待7到15天左右，第三期幼虫便会产生，它们会从粪便中爬出，这一阶段所有的幼虫基本都已经到达了感染期，幼虫会爬到培养皿的周围或者是盖子上，此时可以使用吸管吸入一些生理盐水将幼虫冲洗下来，并滴在载玻片上，覆盖好盖玻片，最终完成镜检。