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为进一步探讨大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭基因ibeB的生物学特性，将ibeB基因克隆到pET28a(+)载体，以E．coliB121(DE3)为宿主菌，经IPTG诱导后，通过Ni^2+-NTA树脂提纯IbeB蛋白．SDS-PAGE确定纯化蛋白的分子量；应用无蛋白酶的体外转录和翻译系统进一步鉴定ibeB基因表达蛋白的分子量；通过[^35S]Met标记的体内T7表达体系并结合膜蛋白分离技术定位IbeB蛋白在细菌中的亚细胞分布；利用细菌侵袭实验分析IbeB蛋白抗体对E．coli K1侵袭人脑微血管内皮细胞的封闭