【摘 要】
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目的 建立简便温和的抗原负载方法,制备具有pH响应性和可生物降解性微囊,实现抗原的有效递送.方法 先采用共沉淀法将鸡卵白蛋白(OVA)包埋于CaCO3颗粒内,然后以此CaCO3颗粒为
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程研究所,天津,300192
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目的 建立简便温和的抗原负载方法,制备具有pH响应性和可生物降解性微囊,实现抗原的有效递送.方法 先采用共沉淀法将鸡卵白蛋白(OVA)包埋于CaCO3颗粒内,然后以此CaCO3颗粒为模板,使鞣酸(TA)与Al(Ⅲ)通过金属有机配位键在模板表面形成涂层,再采用乙二胺四乙酸二钠除去CaCO3模板,得到载有OVA的TA-Al(Ⅲ)微囊[OVA@TA-Al(Ⅲ)微囊].采用场发射扫描电子显微镜、透射电子显微镜、X射线能谱仪和原子力显微镜对微囊进行表征,激光扫描共聚焦显微镜观察OVA的分布情况,考察微囊在不同pH值磷酸盐缓冲液中OVA的累积释放率,噻唑蓝实验检测微囊对永生化的小鼠树突状细胞DC2.4的细胞毒性,激光扫描共聚焦显微镜观察DC2.4细胞对微囊的吞噬情况.结果 场发射扫描电子显微镜和透射电子显微镜结果显示,OVA@TA-Al(Ⅲ)微囊的结构完整,直径约4μm,呈中空、塌陷状态.X射线能谱图显示,微囊共存在C、O、Al、Si和Na 5种元素,其中C、Al及部分O元素属于微囊的组成.原子力显微镜图显示,微囊囊壁厚度均一(约16 nm),具有超薄的囊壁.激光扫描共聚焦显微镜结果显示,OVA均匀分布于CaCO3颗粒中.配位键的pH敏感性使得OVA@TA-Al(Ⅲ)微囊具有pH响应性,此外微囊还具有良好的生物相容性,DC2.4细胞对微囊亦具有较好的吞噬能力.结论 建立了一种简便温和的抗原负载方法,制备的微囊可实现抗原的有效负载和pH响应性递送,有望作为一种新型抗原递送载体用于临床研究.
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