论文部分内容阅读
为获得重组人血管内皮生长因子,采用重叠PCR扩增出含Kozak顺序、α因子前导肽和hVEGF 121的融合基因,经DNA测序无误后,插入Pichia pastoris酵母载体,并体外构建4拷贝表达单元质粒pAO815-4KαVEGF 121.表达载体转化酵母宿主菌GS115,筛选出高效表达hVEGF的转化子.摇瓶培养并1%甲醇诱导80h的VEGF分泌性表达量可达30mg/L.表达产物经S-Sepharose离子交换层析纯化后测活表明表达产物二聚体具有良好生物活性.SDS-PAGE分析、Western印迹表