在毕赤酵母中表达的重组人血管内皮生长因子（rhVEGF121）为氨基端4个氨基酸缺失的异构体

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fdiskhotmail

【摘要】

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为获得重组人血管内皮生长因子,采用重叠PCR扩增出含Kozak顺序、α因子前导肽和hVEGF 121的融合基因,经DNA测序无误后,插入Pichia pastoris酵母载体,并体外构建4拷贝表达单元

【作者】

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陈工马晓骊陈虹王欣黄秉仁

【机构】

：

中国医学科学院基础医学研究所

【出处】

：

中国生物工程杂志

【发表日期】

：

2004年3期

【关键词】

：

毕赤酵母表达重组人血管内皮生长因子氨基酸 Recombinant VEGF Pichia pastoris expression system Amino

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为获得重组人血管内皮生长因子,采用重叠PCR扩增出含Kozak顺序、α因子前导肽和hVEGF 121的融合基因,经DNA测序无误后,插入Pichia pastoris酵母载体,并体外构建4拷贝表达单元质粒pAO815-4KαVEGF 121.表达载体转化酵母宿主菌GS115,筛选出高效表达hVEGF的转化子.摇瓶培养并1%甲醇诱导80h的VEGF分泌性表达量可达30mg/L.表达产物经S-Sepharose离子交换层析纯化后测活表明表达产物二聚体具有良好生物活性.SDS-PAGE分析、Western印迹表

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