【摘 要】
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目的通过观察不同浓度Ⅰ、Ⅱ型胶原酶对退变椎间盘纤维环组织消化效果,探讨适合于纤维环细胞分离培养的优化消化法。方法收集16例退变椎间盘纤维环组织,Ⅰ、Ⅱ型胶原酶单独消
【机 构】
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上海市浦东医院复旦大学附属浦东医院骨科、麻醉科,华中科技大学同济医学院附属同济医院矫形外科
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目的通过观察不同浓度Ⅰ、Ⅱ型胶原酶对退变椎间盘纤维环组织消化效果,探讨适合于纤维环细胞分离培养的优化消化法。方法收集16例退变椎间盘纤维环组织,Ⅰ、Ⅱ型胶原酶单独消化并在0.1%,0.05%,0.01%浓度下联合消化。消化4、8、16、24 h时倒置显微镜下计算纤维环细胞数,台盼蓝染色检查其活力,并观察其生长情况。结果Ⅰ、Ⅱ型胶原酶联合消化细胞数多于单独消化细胞数。联合消化4、8 h时,细胞数随胶原酶消化浓度增加而增多,16、24 h时极低浓度组纤维环细胞数逐渐增多,细胞活力维持在较高水平。结论极低浓度Ⅰ、Ⅱ型胶原酶优化消化法能节省酶量,对细胞损伤小,更适合纤维环细胞分离培养。
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