草鱼呼肠孤病毒HZ08株S10编码蛋白多克隆抗体制备及其特性分析

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为研究草鱼呼肠孤病毒(GCRV)HZ08株S10基因节段编码蛋白的可能功能,采用PCR方法扩增草鱼呼肠孤病毒HZ08株S10基因节段,并把该基因节段克隆至表达载体pET.32a(+),获得的重组表达载体pET-32a—S10转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导表达,表达产物通过SDS—PAGE分析鉴定后,再通过变性、过Ni柱纯化、透析复性纯化获得目的蛋白。然后用纯化的重组蛋白免疫昆明小白鼠,制得多克隆抗体,用间接ELISA方法测定抗体效价,用Western blot和IFA(间接免疫荧光试
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