5-氮胞苷对EB病毒阳性胃癌细胞的影响

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目的 体外建立EB病毒阳性胃癌细胞系并探讨去甲基化试剂5-氮胞苷对EB病毒阳性胃癌的辅助治疗作用.方法 用cell to cell感染法建立EB病毒阳性胃癌细胞系.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和PCR-southern检测不同剂量5-azacytidine处理前后EB病毒启动子的活性,并用Western blot检测EB病毒相关基因的表达.结果 体外感染后筛选的细胞克隆为EB病毒阳性,EBNA免疫荧光染色为阳性.EB病毒相关蛋白的免疫印记显示核蛋白除EBNA1阳性外EBNA2 EBNA3s均为阴性.膜蛋白LMP1也为阴性.5-azacytidine处理后EB病毒阳性胃癌细胞系中被甲基化失活的C启动子重新活化,并表达潜伏性膜蛋白1(LMP1).且呈剂量依赖性.结论 体外通过cell to cell感染方式,可成功建立EB病毒阳性胃癌细胞系.建立的EB病毒阳性胃癌细胞系AGS/EB病毒和NUGC3/EB病毒体外培养呈Ⅰ型潜伏感染.5-azacytidine可能对EB病毒阳性胃癌的特异性治疗有帮助。

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