【摘 要】
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目的在已建 P30克隆载体的基础上,进一步构建表达质粒,诱导以融合蛋白形式表达的能被免疫血清识别的 P30蛋白,并探索最佳表达条件。方法双酶切 P30克隆载体和空白表达质粒 PG
【机 构】
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蚌埠医学院检验系蚌埠233003,蚌埠医学院检验系蚌埠233003,复旦大学遗传所
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目的在已建 P30克隆载体的基础上,进一步构建表达质粒,诱导以融合蛋白形式表达的能被免疫血清识别的 P30蛋白,并探索最佳表达条件。方法双酶切 P30克隆载体和空白表达质粒 PGEX-4T-1,连接后转化入 DH5α进行 PCR 筛选,酶切鉴定和测序验证。重新将重组质粒转化入表达宿主菌 BL21进行诱导。对比不同诱导时间的菌体蛋白 PAGE 图谱,并进行 Western blot鉴定。改变诱导物浓度和培养温度,优化出最佳表达条件。结果构建成功序列和读框正确的重组质粒并表达出特异性 P30抗原,该抗原能被抗
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