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【摘要】 目的 调查肿瘤患者中红细胞血型不规则抗体的检出率及各种特异性不规则抗体的分布特点,并探讨其在安全输血中的临床意义。方法 手术备血患者23 000例,其中男19 769例,女13 231例,采用微柱凝胶抗球蛋白卡进行红细胞血型不规则抗体筛查,对初筛阳性者进行特异性抗体鉴定;对需要输血的患者准备相应抗原阴性的红细胞。结果 ①23 000例样本中检测出红细胞血型不规则抗体者118例,检出率0.51%,其中男性检出率为0.29%(58/19 769)、女性检出率为0.45%(60/13 231),其中以抗-Lea、抗-M、Rh系统的抗体、抗-P1及非特异性抗体较为多见;②118例抗体阳性者,有输血史或妊娠史者89例,其中检出的Rh抗体均有输血史及妊娠史;无输血史或妊娠史者29例,以抗-Lea、抗-M、抗-P1为多见,无Rh系统抗体;③为37例初筛阳性的患者准备了相合红细胞,其中4例进行了相合输血。结论 红细胞血型不规则抗体检出率女性高于男性(χ2=30.10,P<0.0001),其中有临床意义的抗体多分布于有妊娠史或输血史的患者,这对保证输血安全具有重要的临床意义。
【关键词】红细胞血型不规则抗体;微柱凝胶抗球蛋白试验;输血
The clinical significance of detecting IAEG in tumor patients
ZHOU Li-li,Hao Baolan,Wang Shufeng.Henan Tumor Hospital,Zhengzhou 450008,China
【Abstract】 Objective To investigate the positive rate of irregular antibodies of erythrocyte group(IAEG)in tumor patients and distribution characteristic of several kinds of specific antibodies,while exploring the clinical significance of IAEG in safe blood transfusion.Methods 23000 cases ofpatients who would be possible to accept blood transfusion during future surgical operation were detected for irregular antibodies by microcolumn gel antiglobin test and specific antibodies were analysed among the positive cases,while preparing suitable erythrocyte products without the antigen corresponding to the detected antibodies.Results ①There are 118 positive cases among 23000 samples(0.51%)and the positive rates of male and female are 0.29%(58/19769)and 0.45%(60/13231)separately.Anti-Lea,Anti-M,Anti-Rh,Anti-P1 and unspecific antibodies are the main antibodies among them.②There are 89 cases of patients with the history of blood transfusion or gestation and 29 cases of patients with none of them among 118 positive cases.③Suited blood transfusion were prepared for 37 cases and were conducted for 4 cases of patients.Conclusion The positive rate of IAEG in female group are significantly higher than that in male group(χ2=30.10,P<0.0001)and significative antibodies mainly distribute in patients who had history of blood transfusion or gestation.The detecting of IAEG are important to safeguard the blood infusion.
【Key words】Irregular antibodies of erythrocyte group(IAEG);Microcolumn gel antiglobin test;Blood transfusion
红细胞血型不规则抗体(irregular antibodies of erythrocyte group,IAEG),或称意外抗体(unexpected antibodies)是指ABO血型系统以外所有红细胞血型抗体,包括红细胞同种抗体(alloantibodies)和自身抗体(autoantibodies),可致血型鉴定及配血困难,引起溶血性输血反应(HTR)及新生儿溶血病(HDN),自身抗体还可致自身免疫溶血性疾病(AIHA)[1,2]。肿瘤患者由于放化疗或自身骨髓抑制往往需要进行红细胞输注以保证正常治疗,检测肿瘤患者红细胞血型不规则抗体对安全输血的意义已有文献报道[3,4]。
1 资料和方法
1.1 一般资料 2005年01月至2009年10月,从来我院就诊的肿瘤患者中选取手术备血患者、可能需输血治疗的非手术患者23 000例,其中男19 769例,女13 231例,年龄5~79岁。
1.2 仪器试剂 微柱凝胶抗球蛋白卡及专用孵育器、离心机(长春博迅生物技术有限责任公司生产),筛检红细胞、谱红细胞(上海市血液生物医药有限公司生产),多特异性(抗-IgG、抗-C3 d)单克隆抗球蛋白试剂(美国DBL公司生产),单克隆血型抗体试剂(美国DBL公司、上海血液生物医药有限责任公司生产)。
1.3 方法
1.3.1 红细胞血型不规则抗体的筛查 被检者血液标本2~3 ml,3000 r/min离心5 min后,采用微柱凝胶抗球蛋白技术,使被检者血清与筛检红细胞(3人份O型红细胞)反应,为使IgG及IgM类抗体都能充分与红细胞抗原反应,37℃孵育15 min后,再离心判读结果。被检者血浆与3人份筛检红细胞中任何1、2人份或3人份有凝集者为阳性,与3人份筛检红细胞均无凝集者为阴性。
1.3.2 红细胞血型不规则抗体的特异性鉴定 将红细胞血型不规则抗体筛查结果为阳性研究对象的血清,采用微柱凝胶抗球蛋白卡分别与由10人份O型红细胞组成的谱红细胞及自身红细胞(均为1%)反应。与谱红细胞中1至数人份凝集,与自身红细胞不凝集者为特异性抗体,并根据与谱红细胞反应格局判定抗体的特异性;与自身红细胞及所有谱红细胞均凝集者为非特异性抗体;对鉴定为特异性抗体者,采用单克隆血型抗体试剂以确认所检抗体的准确性,对鉴定为非特异性的抗体者,做红细胞直接抗球蛋白试验,观察其自身红细胞在体内被抗体致敏情况。
1.3.3 不规则抗体阳性患者的备血及输血 对检出37℃反应的不规则抗体的患者并准备输血者,根据患者的病情,由我科及市中心血站准备适量相应抗原阴性的红细胞,需输血时与患者配血(间接抗球蛋白法)相合后方可输注。
1.3.4 统计学处理 采用统计软件SAS 9.0进行统计处理,组间比较采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 红细胞血型不规则抗体检出率见表1。女性红细胞血型不规则抗体检出率显著高于男性(χ2=30.10,P<0.0001)。118例红细胞血型不规则抗体阳性者中,以抗-Lea、抗-M、Rh系统的抗体、抗-P1及非特异性抗体较为多见。
2.2 118例抗体阳性者在不同患者人群中的分布情况 ①有输血史或妊娠史者89例,占75.42%(89/118),包含了所检出的绝大多数有临床意义的IgG类抗体,尤其是检出的Rh系统抗体者,全部都有输血史或妊娠史;②无输血史或妊娠史者29例,以抗-Lea、抗-M、抗-P1为多见,无Rh系统抗体。
2.3 不规则抗体阳性患者的备血及输血情况 所检测的23000例患者中,检出37℃反应的红细胞血型不规则抗体,并准备手术或可能输血的患者37例,由我院输血科及市中心血站准备适量对应红细胞血型抗原阴性的红细胞,有4例进行了相合输注,其中2例检出高效价抗-M手术患者,分别输注了M阴性红细胞。
3 讨论
在微柱凝胶抗球蛋白技术建立之前,由于采用传统的试管抗球蛋白试验检测红细胞血型不规则抗体操作繁琐、费时,国内外针对红细胞血型不规则抗体进行前瞻性调查研究的文献报道极少。通过比较大量回顾性研究文献发现,由于不同种族红细胞血型抗原表型存在差异,接受红细胞抗原免疫的机率不同,红细胞血型不规则抗体的检出率及抗体特异性存在人群及地区差异[5]。由于白人患者Rh(D)阴性频率较高,Kell系统抗原表型表现为不均一性,红细胞血型不规则抗体的检出率高达1.09%~2.45%,抗体特异性分布以Rh系统、Lewis系统抗体及抗-K为多见,其次为抗-M、抗-P1、抗-Fya等。微柱凝胶抗球蛋白卡是一种操作简便、结果准确、可实现自动化的抗球蛋白试验,本院采用该技术检测23000例患者红细胞血型不规则抗体,总检出率为0.51%。抗体特异性分布最多的是抗-Lea及抗-M,Rh系统的抗体总数占第三位,其中抗-D只占抗体总数的3.08%。
通常认为,红细胞血型不规则抗体的产生可分为以下3种情况:①新生儿从其母体被动获得IgG类抗体,致敏其红细胞发生HDN;②因同种异体输血、妊娠,受同种异体红细胞抗原刺激而产生是红细胞血型不规则抗体产生的主要原因,因此多次接受输血者及已孕妇女红细胞血型不规则抗体频率较高;③部分红细胞血型不规则抗体可在无明显异体抗原刺激下产生。近年来有报道接受干细胞移植或器官移植后检出免疫性红细胞血型不规则抗体者[6,7]。本研究118例红细胞血型不规则抗体阳性者中,89例有输血史或妊娠史,29例无明显异体抗原刺激产生。118例有输血史及妊娠史的不规则抗体阳性患者中包含了所检出的绝大多数有临床意义的IgG类抗体,尤其是检出的Rh系统抗体者,全部都有输血史或妊娠史。29例在无明显异体抗原刺激下产生的不规则抗体以抗-Lea、抗-M及抗P1较为多见,多为IgM类抗体。表明对有输血史及妊娠史的患者检测红细胞血型不规则抗体较其他患者更具临床意义
我们为检出红细胞血型不规则抗体并准备手术或可能需要输血的肿瘤患者,准备了相应红细胞血型抗原阴性的红细胞,保证了输血及换血的安全,但如没有提前对以上患者进行红细胞血型不规则抗体检测,很难保证及时找到相合供血者。这进一步表明对手术或可能需要输血的患者检测红细胞血型不规则抗体对保证输血安全有重要临床意义。因此我们建议:对有妊娠史或输血史并需要或预备输血的患者、供受者ABO同型但配血不合者、ABO血型正反鉴定不相符者、临床诊断不明确或患者存在用已知诊断不能解释的临床情况的患者应检测红细胞血型不规则抗体。
参考文献
[1] 马曙轩,刘景汉,李锡金,等.微柱凝胶间接抗球蛋白法筛选和鉴定不规则抗体.中国实验血液学杂志,2003,11(2):194-196.
[2] 向东,刘曦,王健莲,等.患者血型不规则抗体的分析.中国输血杂志,2005,18(1):22-23.
[3] 蓝海丽,解德生.受血者血清的不规则抗体筛查与输血安全.中国输血杂志,2004,17(3):170-171.
[4] 李翠莹,穆士杰,郑岩.血型不规则抗体筛选在临床输血中的意义.第四军医大学学报,2002,23(24):2327.
[5] Lin M.Blood groups and transfusion medicine in Taiwan.Formos Med Assoc,1997,96(12):933-942.
[6] Franchini M,Gandini G,Aprili G.Non-ABO red blood cell alloantibodies following allogeneic hematopoietic stem cell transplantation.Bone Marrow Transplant,2004,33(12):1169-1172.
[7] Au WY,Liu CL,Lo CM,et al.Red blood cell alloantibodies and liver transplantation in Chinese patients.Transplantation,2003,76(2):324-326.
【关键词】红细胞血型不规则抗体;微柱凝胶抗球蛋白试验;输血
The clinical significance of detecting IAEG in tumor patients
ZHOU Li-li,Hao Baolan,Wang Shufeng.Henan Tumor Hospital,Zhengzhou 450008,China
【Abstract】 Objective To investigate the positive rate of irregular antibodies of erythrocyte group(IAEG)in tumor patients and distribution characteristic of several kinds of specific antibodies,while exploring the clinical significance of IAEG in safe blood transfusion.Methods 23000 cases ofpatients who would be possible to accept blood transfusion during future surgical operation were detected for irregular antibodies by microcolumn gel antiglobin test and specific antibodies were analysed among the positive cases,while preparing suitable erythrocyte products without the antigen corresponding to the detected antibodies.Results ①There are 118 positive cases among 23000 samples(0.51%)and the positive rates of male and female are 0.29%(58/19769)and 0.45%(60/13231)separately.Anti-Lea,Anti-M,Anti-Rh,Anti-P1 and unspecific antibodies are the main antibodies among them.②There are 89 cases of patients with the history of blood transfusion or gestation and 29 cases of patients with none of them among 118 positive cases.③Suited blood transfusion were prepared for 37 cases and were conducted for 4 cases of patients.Conclusion The positive rate of IAEG in female group are significantly higher than that in male group(χ2=30.10,P<0.0001)and significative antibodies mainly distribute in patients who had history of blood transfusion or gestation.The detecting of IAEG are important to safeguard the blood infusion.
【Key words】Irregular antibodies of erythrocyte group(IAEG);Microcolumn gel antiglobin test;Blood transfusion
红细胞血型不规则抗体(irregular antibodies of erythrocyte group,IAEG),或称意外抗体(unexpected antibodies)是指ABO血型系统以外所有红细胞血型抗体,包括红细胞同种抗体(alloantibodies)和自身抗体(autoantibodies),可致血型鉴定及配血困难,引起溶血性输血反应(HTR)及新生儿溶血病(HDN),自身抗体还可致自身免疫溶血性疾病(AIHA)[1,2]。肿瘤患者由于放化疗或自身骨髓抑制往往需要进行红细胞输注以保证正常治疗,检测肿瘤患者红细胞血型不规则抗体对安全输血的意义已有文献报道[3,4]。
1 资料和方法
1.1 一般资料 2005年01月至2009年10月,从来我院就诊的肿瘤患者中选取手术备血患者、可能需输血治疗的非手术患者23 000例,其中男19 769例,女13 231例,年龄5~79岁。
1.2 仪器试剂 微柱凝胶抗球蛋白卡及专用孵育器、离心机(长春博迅生物技术有限责任公司生产),筛检红细胞、谱红细胞(上海市血液生物医药有限公司生产),多特异性(抗-IgG、抗-C3 d)单克隆抗球蛋白试剂(美国DBL公司生产),单克隆血型抗体试剂(美国DBL公司、上海血液生物医药有限责任公司生产)。
1.3 方法
1.3.1 红细胞血型不规则抗体的筛查 被检者血液标本2~3 ml,3000 r/min离心5 min后,采用微柱凝胶抗球蛋白技术,使被检者血清与筛检红细胞(3人份O型红细胞)反应,为使IgG及IgM类抗体都能充分与红细胞抗原反应,37℃孵育15 min后,再离心判读结果。被检者血浆与3人份筛检红细胞中任何1、2人份或3人份有凝集者为阳性,与3人份筛检红细胞均无凝集者为阴性。
1.3.2 红细胞血型不规则抗体的特异性鉴定 将红细胞血型不规则抗体筛查结果为阳性研究对象的血清,采用微柱凝胶抗球蛋白卡分别与由10人份O型红细胞组成的谱红细胞及自身红细胞(均为1%)反应。与谱红细胞中1至数人份凝集,与自身红细胞不凝集者为特异性抗体,并根据与谱红细胞反应格局判定抗体的特异性;与自身红细胞及所有谱红细胞均凝集者为非特异性抗体;对鉴定为特异性抗体者,采用单克隆血型抗体试剂以确认所检抗体的准确性,对鉴定为非特异性的抗体者,做红细胞直接抗球蛋白试验,观察其自身红细胞在体内被抗体致敏情况。
1.3.3 不规则抗体阳性患者的备血及输血 对检出37℃反应的不规则抗体的患者并准备输血者,根据患者的病情,由我科及市中心血站准备适量相应抗原阴性的红细胞,需输血时与患者配血(间接抗球蛋白法)相合后方可输注。
1.3.4 统计学处理 采用统计软件SAS 9.0进行统计处理,组间比较采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 红细胞血型不规则抗体检出率见表1。女性红细胞血型不规则抗体检出率显著高于男性(χ2=30.10,P<0.0001)。118例红细胞血型不规则抗体阳性者中,以抗-Lea、抗-M、Rh系统的抗体、抗-P1及非特异性抗体较为多见。
2.2 118例抗体阳性者在不同患者人群中的分布情况 ①有输血史或妊娠史者89例,占75.42%(89/118),包含了所检出的绝大多数有临床意义的IgG类抗体,尤其是检出的Rh系统抗体者,全部都有输血史或妊娠史;②无输血史或妊娠史者29例,以抗-Lea、抗-M、抗-P1为多见,无Rh系统抗体。
2.3 不规则抗体阳性患者的备血及输血情况 所检测的23000例患者中,检出37℃反应的红细胞血型不规则抗体,并准备手术或可能输血的患者37例,由我院输血科及市中心血站准备适量对应红细胞血型抗原阴性的红细胞,有4例进行了相合输注,其中2例检出高效价抗-M手术患者,分别输注了M阴性红细胞。
3 讨论
在微柱凝胶抗球蛋白技术建立之前,由于采用传统的试管抗球蛋白试验检测红细胞血型不规则抗体操作繁琐、费时,国内外针对红细胞血型不规则抗体进行前瞻性调查研究的文献报道极少。通过比较大量回顾性研究文献发现,由于不同种族红细胞血型抗原表型存在差异,接受红细胞抗原免疫的机率不同,红细胞血型不规则抗体的检出率及抗体特异性存在人群及地区差异[5]。由于白人患者Rh(D)阴性频率较高,Kell系统抗原表型表现为不均一性,红细胞血型不规则抗体的检出率高达1.09%~2.45%,抗体特异性分布以Rh系统、Lewis系统抗体及抗-K为多见,其次为抗-M、抗-P1、抗-Fya等。微柱凝胶抗球蛋白卡是一种操作简便、结果准确、可实现自动化的抗球蛋白试验,本院采用该技术检测23000例患者红细胞血型不规则抗体,总检出率为0.51%。抗体特异性分布最多的是抗-Lea及抗-M,Rh系统的抗体总数占第三位,其中抗-D只占抗体总数的3.08%。
通常认为,红细胞血型不规则抗体的产生可分为以下3种情况:①新生儿从其母体被动获得IgG类抗体,致敏其红细胞发生HDN;②因同种异体输血、妊娠,受同种异体红细胞抗原刺激而产生是红细胞血型不规则抗体产生的主要原因,因此多次接受输血者及已孕妇女红细胞血型不规则抗体频率较高;③部分红细胞血型不规则抗体可在无明显异体抗原刺激下产生。近年来有报道接受干细胞移植或器官移植后检出免疫性红细胞血型不规则抗体者[6,7]。本研究118例红细胞血型不规则抗体阳性者中,89例有输血史或妊娠史,29例无明显异体抗原刺激产生。118例有输血史及妊娠史的不规则抗体阳性患者中包含了所检出的绝大多数有临床意义的IgG类抗体,尤其是检出的Rh系统抗体者,全部都有输血史或妊娠史。29例在无明显异体抗原刺激下产生的不规则抗体以抗-Lea、抗-M及抗P1较为多见,多为IgM类抗体。表明对有输血史及妊娠史的患者检测红细胞血型不规则抗体较其他患者更具临床意义
我们为检出红细胞血型不规则抗体并准备手术或可能需要输血的肿瘤患者,准备了相应红细胞血型抗原阴性的红细胞,保证了输血及换血的安全,但如没有提前对以上患者进行红细胞血型不规则抗体检测,很难保证及时找到相合供血者。这进一步表明对手术或可能需要输血的患者检测红细胞血型不规则抗体对保证输血安全有重要临床意义。因此我们建议:对有妊娠史或输血史并需要或预备输血的患者、供受者ABO同型但配血不合者、ABO血型正反鉴定不相符者、临床诊断不明确或患者存在用已知诊断不能解释的临床情况的患者应检测红细胞血型不规则抗体。
参考文献
[1] 马曙轩,刘景汉,李锡金,等.微柱凝胶间接抗球蛋白法筛选和鉴定不规则抗体.中国实验血液学杂志,2003,11(2):194-196.
[2] 向东,刘曦,王健莲,等.患者血型不规则抗体的分析.中国输血杂志,2005,18(1):22-23.
[3] 蓝海丽,解德生.受血者血清的不规则抗体筛查与输血安全.中国输血杂志,2004,17(3):170-171.
[4] 李翠莹,穆士杰,郑岩.血型不规则抗体筛选在临床输血中的意义.第四军医大学学报,2002,23(24):2327.
[5] Lin M.Blood groups and transfusion medicine in Taiwan.Formos Med Assoc,1997,96(12):933-942.
[6] Franchini M,Gandini G,Aprili G.Non-ABO red blood cell alloantibodies following allogeneic hematopoietic stem cell transplantation.Bone Marrow Transplant,2004,33(12):1169-1172.
[7] Au WY,Liu CL,Lo CM,et al.Red blood cell alloantibodies and liver transplantation in Chinese patients.Transplantation,2003,76(2):324-326.