【摘 要】
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目的探讨脑胶质瘤相关癌基因-1（Gli1）在胰腺癌细胞侵袭和迁移中的作用及可能机制。方法体外培养胰腺癌细胞株Capan-2，通过RNA干扰技术分别干扰Capan-2细胞中的Gli1、小鼠双微体基因2（MDM2）和p53基因的表达。应用实时定量（qRT）-PCR试验进行干扰效应的验证；通过细胞侵袭和迁移实验观察干扰Capan-2细胞中Gli1、MDM2和p53表达对胰腺癌细胞侵袭和迁移的影响。同时通
【机 构】
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110001沈阳，中国医科大学附属第一医院胃肠外科,110001沈阳，中国医科大学附属第一医院胃肠外科,110001沈阳，中国医科大学附属第一医院胃肠外科,辽宁省人民医院普外科,110001沈阳，中国
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目的探讨脑胶质瘤相关癌基因-1（Gli1）在胰腺癌细胞侵袭和迁移中的作用及可能机制。
方法体外培养胰腺癌细胞株Capan-2，通过RNA干扰技术分别干扰Capan-2细胞中的Gli1、小鼠双微体基因2（MDM2）和p53基因的表达。应用实时定量（qRT）-PCR试验进行干扰效应的验证；通过细胞侵袭和迁移实验观察干扰Capan-2细胞中Gli1、MDM2和p53表达对胰腺癌细胞侵袭和迁移的影响。同时通过Western blot法检测干扰Gli1表达后，金属基质蛋白酶-9（MMP-9）、磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶（pERK）及磷酸化蛋白激酶B（pAKT）在Capan-2细胞中表达的变化。采用配对t检验对实验数据进行统计学分析。
结果qRT-PCR试验结果显示，干扰Gli1、MDM2、p53表达后，其mRNA水平较仅加脂质体组和对照组相比分别下调了70.5%和74.5%、61.8%和65.3%、73.8%和78.2%。在p53野生型Capan-2细胞中，干扰Gli1表达后胰腺癌细胞侵袭（94±8）和迁移能力（143±8）较对照组（150±7，190±10）均明显减弱（t=6.584，P=0.022；t=8.266，P=0.014）；干扰MDM2表达亦降低了细胞的侵袭（实验组：85±12，对照组：138±6）和迁移能力（实验组：127±9，对照组：180±10）（t=5.097，P=0.036；t=4.860，P=0.040）。然而，体外干扰p53基因表达后，Capan-2细胞的侵袭（153±11）和迁移能力（209±13）较干扰前（106±7，164±8）却明显增强（t=4.669，P=0.043；t=4.990，P=0.038）。Western blot法检测结果显示，体外干扰Gli1表达后MMP-9蛋白表达水平下调，但pERK和pAKT蛋白水平表达无改变。
结论Gli1可能通过调控MDM2、p53及MMP-9的表达水平促进胰腺癌细胞的侵袭和迁移。
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