pSLX-CMV/TβRII-IgG1Fc载体的构建

来源 :胃肠病学和肝病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhangliu2009

【摘要】

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目的构建表达人TGF-β111型受体细胞外结合区和人IgG1 Fc的融合蛋白逆转录病毒载体，为进一步肝纤维化的基因治疗奠定实验基础。方法以RT-PCR方法扩增目的基因TβRII-IgG1 Fc，

【作者】

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高巍周永兴张惠中聂青和

【机构】

：

西安市第四军医大学唐都医院

【出处】

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胃肠病学和肝病学杂志

【发表日期】

：

2005年3期

【关键词】

：

Fc 逆转录病毒载体 RT-PCR方法重组DNA技术 PA317细胞病毒滴度测定基因治疗肝纤维化重组质粒人IgG1 TGF-β 脂质体介导限制性酶

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目的构建表达人TGF-β111型受体细胞外结合区和人IgG1 Fc的融合蛋白逆转录病毒载体，为进一步肝纤维化的基因治疗奠定实验基础。方法以RT-PCR方法扩增目的基因TβRII-IgG1 Fc，扩增产物纯化后克隆至测序载体pGEM-T-Easy，挑取阳性克隆酶切鉴定后测序；利用重组DNA技术，将TβRII-IgG1 Fc基因亚克隆至逆转录病毒载体pSLX-GMV中，重组质粒pSLX-CMV／TβRII-IgG1 Fc在脂质体介导F转染PA317包装细胞，G418筛选，直至出现抗性克隆，扩大培养，测定病毒

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