【摘 要】
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重组质粒pET-E转化宿主菌BL21,经1.0mmol/LIPTG诱导,外源基因以包含体的形式获得高效表达.通过Western blotting检测证明表达产物具有良好的抗原性.以纯化后表达产物作为诊断
【机 构】
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南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点实验室,南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点实验室
【基金项目】
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国家“863”高技术发展计划资助项目(2001AA249012)
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重组质粒pET-E转化宿主菌BL21,经1.0mmol/LIPTG诱导,外源基因以包含体的形式获得高效表达.通过Western blotting检测证明表达产物具有良好的抗原性.以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测JEV抗体的间接ELISA方法.结果表明,抗原的最佳稀释度为1:2000,血清的最佳稀释度为1:200,待检血清阳性标准初步定为:OD490nm＞1.2,且待检血清与阴性血清的OD490m比值大于2.
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