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目的构建肾癌相关抗原G250小分子干扰RNA(siRNA)表达载体,通过抑制G250基因的表达,探索肾癌基因治疗的新途径。方法根据基因库上的肾癌相关抗原G250 mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的75个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接至线性化的质粒pRNAT-U6.1/Neo中,构建成重组质粒(命名为pshRNA—G250a,pshRNA-G250b),进行酶切及序列鉴定。结果pshRNA-G250表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA序列一致。结论成功构