【摘 要】
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目的 观察分化抑制因子1(inhibitor of DNA binding 1,ID1)通过调控血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)表达对骨肉瘤143B细胞血管生成影响,并
【机 构】
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400010重庆,重庆医科大学附属第二医院脊柱外科;400037,重庆,陆军军医大学(第三军医大学)附属第二医院病理科
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目的 观察分化抑制因子1(inhibitor of DNA binding 1,ID1)通过调控血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)表达对骨肉瘤143B细胞血管生成影响,并验证人骨肉瘤组织中ID1与血管生成和VEGF-A表达相关性.方法 收集33例人骨肉瘤石蜡组织,利用免疫组化分析ID1表达与微血管密度(microvessel density,MVD)相关性,并结合生物信息学分析,探讨骨肉瘤中ID1与血管生成相关通路及VEGF-A表达的相关性.利用慢病毒和小干扰RNA建立差异表达ID1的143B细胞株,制备相应细胞条件培养基(conditional medium,CM),通过Transwell迁移、小管形成实验,比较各组CM对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVCEs)迁移和成管能力的影响;利用PCR、Western blot、ELISA检测差异表达ID1后143B细胞中VEGF-A的表达.结果 生信分析提示ID1参与多条骨肉瘤血管生成相关通路,且VEGF-A与ID1的mRNA表达呈正相关(r=0.244 1,P=0.005 7).33例人体骨肉瘤组织中ID1阳性表达组中MVD较ID1阴性组明显增高(P＜0.05),且ID1与VEGF-A蛋白表达呈正相关(r=0.464 3,P=0.006 5).体外实验证实过表达ID1组较对照组的CM能显著促进内皮细胞迁移和成管能力(P＜0.05);与之对应,敲低ID1表达组较无效干扰组的CM能抑制内皮细胞迁移和成管能力(P＜0.05).过表达ID1的143B细胞中VEGF-A表达和分泌显著升高,而敲低ID1表达后143B细胞中VEGF-A表达和分泌降低(P＜0.05).结论 ID1可能通过上调骨肉瘤细胞中的VEGF-A表达来促进骨肉瘤血管生成.
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