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目的 探讨NOD样受体家族核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎症小体活化在脓毒症大鼠肠道黏膜屏障破坏中的作用,以及乌司他丁(UTI)对脓毒症大鼠肠道核转录因子-κB(NF-κB)/NLRP3炎症小体信号通路表达的影响.方法 按照随机数字表法将64只雄性Wistar大鼠分为假手术(Sham)组、盲肠结扎穿孔术(CLP)组、UTI干预组(CLP术后1、6、12、18?h腹腔注射100?kU/kg?UTI)和UTI预处理组(在UTI干预组基础上于CLP术前1?h腹腔注射100?kU/kg?UTI),每组16只.观察大鼠24?h存活情况,于制模后24?h?腹主动脉采血并处死大鼠取回肠组织.采用苏木素-伊红(HE)染色观察回肠病理学改变并进行回肠黏膜Chiu评分;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)水平;用蛋白质免疫印迹试验(Western?blotting)检测小肠组织核转录因子-κB?p65?(NF-κB?p65)表达;用免疫组化法检测肠道紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、闭合蛋白(Occludin)以及炎症小体NLRP3、凋亡相关斑点蛋白(ASC)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)的表达.结果 与Sham组相比,CLP组术后24?h存活率明显下降;组织病理学结果显示黏膜及黏膜下间质严重水肿,炎性细胞浸润明显,绒毛排列紊乱,部分腺体结构不完整、绒毛结构严重破坏,Chiu评分显著升高;血清TNF-α、IL-1β、I-FABP水平均明显升高;小肠组织NF-κB?p65蛋白表达明显增加;小肠黏膜组织Claudin-1、Occludin表达减少,而炎症小体NLRP3、caspase-1、ASC表达增加.提示脓毒症大鼠小肠黏膜屏障功能障碍、黏膜通透性增加、紧密连接蛋白表达减少,NLRP3炎症小体及其上游分子NF-κB?p65活化.与CLP组相比,给予UTI干预或UTI预处理后,脓毒症大鼠24?h存活率虽无明显差异(62.5％、68.8％比43.8％,均P>0.05),但肠道组织损伤得到明显缓解,具体表现为:Chiu评分及血清TNF-α、IL-1β、I-FABP水平明显降低〔Chiu评分(分):3.37±0.25、3.23±?0.16比4.08±0.13,TNF-α(ng/L):147.62±20.74、140.71±24.81比222.82±16.84,IL-1β(ng/L):80.64±5.68、78.11±4.75比133.73±3.92,I-FABP(μg/L):38.29±3.60、35.88±4.52比59.81±4.66,均P<0.05〕,小肠组织NF-κB?p65蛋白表达明显下降(NF-κB?p65/β-actin:0.65±0.10、0.69±0.11比0.99±0.10,均P<0.05),小肠组织Claudin-1、Occludin阳性表达有所升高〔Claudin-1阳性面积:(19.43±3.08)％、(23.99±6.27)％比(7.77±?2.03)％,Occludin阳性面积:(19.58±4.75)％、(23.28±3.68)％比(11.69±4.30)％,均P<0.05〕,而炎症小体?NLRP3、caspase-1、ASC阳性表达有所降低〔NLRP3阳性面积:(7.80±3.14)％、(6.86±2.63)％比(14.44±?3.68)％,caspase-1阳性面积:(10.62±3.52)％、(9.49±3.09)％比(26.69±8.05)％,ASC阳性面积:(9.95±2.81)％、(10.53±3.61)％比(24.16±5.48)％,均P<0.05〕.但UTI干预组与UTI预处理组的改善作用差异均无统计学意义.结论 脓毒症时肠道屏障功能障碍可能与肠黏膜中NLRP3炎症小体活化有关;UTI的肠道黏膜保护作用可能与抑制肠黏膜中NLRP3炎症小体活化有关,但UTI预处理与UTI干预比较并未有明显优势.