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以0℃低温处理3~5叶期扁蓿豆的幼苗嫩叶为试验材料,对影响其cDNA—AFLP反应体系的各个关键因子进行探讨和优化,建立适宜的扁蓿豆cDNA-AFLP扩增体系,并对扁蓿豆冷诱导的差异表达进行检测。结果表明,利用Mse I/EcoR1分步酶切连接,以4μl稀释20倍的预扩产物作为模板、1.6μl dNTP、0.4μl TaqDNA酶、2μl 0×PCR Buffer获得的选择性扩增效果较好,条带清晰稳定。应用该反应体系扩增出的扁蓿豆冷诱导差异片段有五种表达类型,为扁蓿豆抗寒基因转录水平差异表达的研