PcDNA3．1-rhGM-CSF重组质粒的构建及生物活性鉴定

来源 :西部医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：m634606037

【摘要】

：

目的构建PcDNA3．1-rhGM-CSF真核细胞表达载体，初步观察其对髓系白血病细胞K562细胞生长的影响。方法采用PCR、T—A克隆及基因定向克隆技术，将mG胁CSF基因插入PcDNA3．1（＋）空载体，构建

【作者】

：

朱红唐恩洁

【机构】

：

川北医学院基础医学院

【出处】

：

西部医学

【发表日期】

：

2010年3期

【关键词】

：

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子重组表达载体细胞分化 GM-CSF Recombinant eukaryotic coexpression plasmid Ce

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目的构建PcDNA3．1-rhGM-CSF真核细胞表达载体，初步观察其对髓系白血病细胞K562细胞生长的影响。方法采用PCR、T—A克隆及基因定向克隆技术，将mG胁CSF基因插入PcDNA3．1（＋）空载体，构建了PcDNA3．1-rhGM—CSF真核表达载体。经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定。转染人髓系白血病细胞K562细胞72h后，采用RT-PCR方法、NBT试验、MTT试验、免疫组化技术，观察和分析PcDNA3．1-rhGM—CSF在K562细胞中的表达及其对该细胞的影响。结论成功构建了PcD

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