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目的构建PcDNA3.1-rhGM-CSF真核细胞表达载体,初步观察其对髓系白血病细胞K562细胞生长的影响。方法采用PCR、T—A克隆及基因定向克隆技术,将mG胁CSF基因插入PcDNA3.1(+)空载体,构建了PcDNA3.1-rhGM—CSF真核表达载体。经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定。转染人髓系白血病细胞K562细胞72h后,采用RT-PCR方法、NBT试验、MTT试验、免疫组化技术,观察和分析PcDNA3.1-rhGM—CSF在K562细胞中的表达及其对该细胞的影响。结论成功构建了PcD