金标银染技术在表达文库筛选中的应用

来源 :南开大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiayin228699
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以胶体金标记钙调素作为探针再辅以银染法(金标银染技术), 自玉米cDNA表达文库中筛选钙调素结合蛋白.该探针保持钙调素的活性,特异性地与钙调素结合蛋白相结合,在胶体金标记的基础上进行银染,灵敏度获得显著提高(达ng级).应用这一方法对玉米cDNA表达文库进行筛选获得了一个与探针特异结合的阳性克隆.以生物素标记的钙调素对该克隆表达的融合蛋白进行结合实验,结果表明该克隆编码的蛋白为一个钙调素结合蛋白.本文首次报道了以金标银染技术运用于表达文库的筛选并得到阳性克隆,这一方法的建立为cDNA表达文库的筛选提供了简便、快速的方法.
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