【摘 要】
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目的利用双电极电压钳技术检测组成人烟碱型乙酰胆碱受体离子导电孔道的主要氨基酸位点。方法用定点突变的方法将人alpha 7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nAChR)亚基跨膜区段M2的氨基酸(Leu248–Ala258)逐一突变为亲水性的丝氨酸,随后利用cDNA质粒体外转录获得cRNA,并将单个突变体的cRNA注射到非洲爪蟾卵母细胞中。注射1~3 d后,利用双电极电压钳检测野生型(WT)α7 nAChR及各突变体的功能。结果获得跨膜区段M2亲水性突变后,与WT相比,发现4个亲水性突变体(L248、V252、L25
【基金项目】
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首都医科大学校长基金技术类(2014JS18)。
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目的利用双电极电压钳技术检测组成人烟碱型乙酰胆碱受体离子导电孔道的主要氨基酸位点。方法用定点突变的方法将人alpha 7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nAChR)亚基跨膜区段M2的氨基酸(Leu248–Ala258)逐一突变为亲水性的丝氨酸,随后利用cDNA质粒体外转录获得cRNA,并将单个突变体的cRNA注射到非洲爪蟾卵母细胞中。注射1~3 d后,利用双电极电压钳检测野生型(WT)α7 nAChR及各突变体的功能。结果获得跨膜区段M2亲水性突变后,与WT相比,发现4个亲水性突变体(L248、V252、L25
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