伪狂犬病病毒蛋白激酶基因部分序列的克隆和序列测定及转移质粒载体的构建

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaorixue
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
以伪狂犬病病毒SH株细胞培养物为模板,用PCR方法扩增蛋白激酶(PK)基因部分片段,克隆到pCDNA3中,序列测定显示所扩增的PK基因片段长907bp,与PRV NIA-3株的核苷酸同源性为99.6%.把PK基因克隆到pUC19上,利用PK基因中间的SalI酶切位点,插入带有绿色荧光蛋白(EGFP)的基因表达盒,构成了含EGFP的转移载体,为今后研究PK基因的功能和构建PK缺失株奠定了基础.
其他文献
A/Ann Arbor/6/60Ca(H2N2)冷适应疫苗供体株具有冷适应性、温度敏感性和致弱性表型。本研究利用基因工程技术体外合成A/Ann Arbor/6/60Ca(H2N2)冷适应疫苗株具有冷适应性的内部基因PB2
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)嗜好在PAM和其他单核细胞上生长,如果把PRRSV作为一种病毒活载体,它就可以携带外源抗原高效进入猪体的免疫系统,更好地刺激机体产生免疫应答.
对猪繁殖与呼吸综合征病毒的非结构基因(ORF1)和非编码区分别进行了克隆和测序,并对其基因特征作了分析。结果表明,CH-1a株ORF1全长11882nt,其中ORF1a长7512nt、ORF1b长4374nt。它
分别将猪圆环病毒2型的ORF2基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒的ORF5基因,插入到鸡痘病毒转移载体pUTA2—16-LacZ单一启动子和复合启动子下游,构建重组鸡痘病毒转移质粒pUTAL-ORF5-
从含有猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N)的质粒扩增出N基因,构建禽痘病毒转移载体。该载体含有禽痘病毒早晚期启动子LP2EP2控制之下的PRRSVN基因、P11启动下的报告基因
检测构建于真核表达载体PCI上的禽流感H5亚型(H5N1)HA基因的基因转染效率及瞬时表达,为基因疫苗的体外表达提供依据.在体外扩增并酶切鉴定PCIHA质粒;常规方法培养COS-7细胞;
为了克隆禽腺联病毒(Avian adeno-associated virus,AAAV)全基因组用于构建基因转移载体研究,以鸡胚致死孤儿病毒(CELO)作为辅助病毒与AAAV共接种SPF鸡胚进行AAAV的增殖,将AAAV约4.7k
提取猪瘟病毒石门系强毒株的基因组RNA,用RT-PCR扩增其Erns基因的cDNA,将其克隆到原核表达载体pPROEXTMHTc中,然后转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导,Erns基因获得高效表达.SDS-P
将猪圆环病毒2型(Type2 porcine circovirus,PCV2)JXL株cDNA插入到载体pMD18-T中,获得的pMDT-PCV转染猪肾细胞PK15细胞系,盲传4代后,利用PCV2阳性猪血清进行间接免疫荧光抗体试验(IF
本研究利用抗美洲型病毒株的GP3、GP5和N蛋白的11株单克隆抗体,对国内分离毒株的GP3、GP5和N蛋白的抗原表位进行鉴别,并同国外参考毒株VR-2332、NVSL(美洲型,B型)、Lelystad(