海洋细菌Bacillus sp.2-羰基还原酶的纯化和性质

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从一株海洋细菌Bacillus sp.中通过硫酸铵分级盐析、Q Sepharose FF阴离子交换层析、Hydroxyapatite柱层析和Sephadex G-100凝胶过滤,分离纯化出一种3-脱氧葡糖醛酮代谢酶,定性为2-羰基醛还原酶.以粗酶液作起始,所获样品纯度提高141.4倍,活力回收率11.4%.2-羰基醛化合物对该酶是特异性很好的底物,该酶对3-脱氧葡糖醛酮的Km为2.5mmol/L,分子量约为33kD,反应最适pH为6.2,在pH5.0~8.0,温度30℃以下酶活保持稳定.适量的ED-TA、巯基乙醇或二硫苏糖醇能提高酶的活性,碘乙酸、N-乙基顺丁烯二酰亚胺均造成酶部分失活.
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