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目的 探讨在成骨诱导环境下,辛伐他汀对BMSCs成骨分化中晚期的作用和对p38MAPK信号通路的影响.方法 取20只雌性SD大鼠双侧股骨和胫骨骨髓,全骨髓培养法分离培养BMSCs并传代,取第2代细胞进行实验.实验分为5组,对照组(CM组):完全培养基培养;辛伐他汀组(SIM组):含终浓度为1×10-7 mol/L辛伐他汀的完全培养基培养;成骨诱导培养基组(OM组):含10 mmol/Lβ甘油磷酸钠和50μg/mL抗坏血酸的成骨诱导培养基培养;辛伐他汀和成骨诱导培养基组(OM+SIM组):含终浓度为1×10-7 mol/L辛伐他汀成骨诱导培养基培养;阻断剂组(OM+SIM+SB组):先用p38MAPK信号通路阻断剂SB203580干预30 min后,再采用含终浓度为1×10-7 mol/L辛伐他汀成骨诱导培养基培养.MTT法检测CM组和SIM组细胞活性;ELISA法检测OM组及OM+SIM组培养7、14 d细胞ALP含量.应用实时定量PCR和Western blot方法检测OM组和OM+SIM组第21、28天开始成骨诱导培养1、12、24 h后,骨钙素(osteocalcin,OCN)蛋白和mRNA表达水平,从而确定辛伐他汀作用最佳时间点,随后检测该时间点OM组、OM+SIM组和OM+SIM+SB组p38、磷酸化p38 (phospho-p38,p-p38)蛋白表达,计算p-p38/p38.结果 MTT检测示各时间点,SIM组与CM组吸光度(A)值比较差异无统计学意义(P＞0.05),提示辛伐他汀对BMSCs活性和增殖能力无明显影响.与OM组相比,OM+SIM组7、14 d ALP含量均明显增高,且两组组内7 d ALP含量均高于14 d,差异均有统计学意义(P＜0.05).实时定量PCR及Western blot检测示,第21、28天开始成骨诱导培养后,各组OCN mRNA及蛋白在12 h时表达量高于其他时间点(P＜0.05),且OM+SIM组明显高于OM组(P＜0.05);确定辛伐他汀诱导成骨干预的最佳起效时间为12 h.阻断剂干预后,12 h时OM+SIM+SB组p-p38/p38明显低于其他两组(P＜0.05),OM+SIM组高于OM组(P＜0.05).结论 辛伐他汀的最佳起效时间为给药后12 h,其可以提高BMSCs成骨分化中晚期OCN蛋白、mRNA和p-p38蛋白表达量.