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目的:建立以反相高效液相色谱法测定入血浆中二甲胺四环素浓度的方法。方法:色谱柱为C18流动相为乙腈-水-三氟乙酸(15:85:0.1),内标为土霉素,检测波长为350nm,血样在pH=6.5缓冲液务件下用乙酸乙酯提取,以二甲胺四环素与内标的峰面积比进行定量。结果:二甲胺四环素检测浓度线性范围为0.05~8μg/ml(r=0.9999),最低检测浓度为0.02μ/ml。平均回收率为101.89%,日内、日间相对标准差均小于5%。结论:本方法简便、快速、灵敏,可用于二甲胺四环素药动学研究。