一步法RT—PCR检测烟草环斑病毒试剂盒的研制与应用

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根据烟草环斑病毒基因组序列设计特异性引物,利用RT—PCR技术研制成一步法检测该病毒的试剂盒,并建立了操作程序。对试剂盒扩增到的预期产物进行测序验证,产物序列与目的序列间的同源性为97.8%,表明该试剂盒的准确性较高。试验结果还表明,该试剂盒在常温、4℃和-20℃下可分别保存2d、7d和60d;灵敏度是DAS—ELISA的100倍;质量控制试验结果一致,具有较高的重复性。
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