基于CRISPR-Cas9技术构建gpr41基因敲除的RAW264.7细胞系

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lizhe_sky

【摘要】

：

采用CRISPR-Cas9基因编辑技术,构建G-蛋白偶联受体41(gpr41)基因敲除的RAW264.7细胞系。利用慢病毒转染,构建稳定表达Cas9蛋白的巨噬细胞株。针对gpr41基因作用的功能区域,设

【作者】

：

苏丛徐方明伍婷张鹏飞陈昊然刘艳艳兰燕虎李家斌

【机构】

：

安徽医科大学附属巢湖医院感染病科,安徽医科大学第一附属医院感染病科,安徽省细菌耐药性监控中心,安徽医科大学细菌耐药研究所

【出处】

：

安徽医科大学学报

【发表日期】

：

2020年5期

【关键词】

：

CRISPR-Cas9技术 gpr41 巨噬细胞基因敲除 CRISPR-Cas9 technologygpr41macrophagesgene knockou

【基金项目】

：

国家自然科学基金(编号:81673242、81973983),安徽高校自然科学研究项目(编号:KJ2018A0193),安徽省高校优秀青年人才支撑计划(编号:gxyq2018010)

下载到本地 , 更方便阅读

下载此文赞助VIP

声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架

论文部分内容阅读

采用CRISPR-Cas9基因编辑技术,构建G-蛋白偶联受体41(gpr41)基因敲除的RAW264.7细胞系。利用慢病毒转染,构建稳定表达Cas9蛋白的巨噬细胞株。针对gpr41基因作用的功能区域,设计靶向gpr41基因的向导RNA(gRNA),构建pLenticrisprV2重组质粒转化DH5α感受态细胞,筛选出重组子测序验证gRNA的有效性。鉴定成功的pLenticrisprV2-gpr41-gRNA重组质粒采用转染试剂转染巨噬细胞系RAW264.7。筛选阳性单克隆细胞株,Western blot检

其他文献

强场下氢分子离子高次谐波谱的振动响应

利用含时波包方法中的劈裂算符方案研究了激光场中分子振动对氢分子离子高次谐波谱的影响．研究表明，平台区的高次谐波的强度随着振动量子数的增大而增强，增大激光强度能产生更强

期刊

含时波包方法劈裂算符方案高次谐波H2+time - dependert wave packet method split - operator sch

先天性鼻侧裂缺畸形2例

先天性鼻侧裂缺畸形临床罕见。作者等所在空军西安医院美容外科,1989年8月和1991年4月遇2例,报告如下。例1,男,24岁。湖南邵东县农民。1989年8月入院。出生后右鼻翼缺失,随增

期刊

鼻侧裂空军西安医院内眦部皮下脂肪鼻肌溢泪鼻根部下睑缘缺隙美容外科

中国企业国际合作创新收益水平评价体系研究

笔者以中外企业合作创新的收益问题作为研究埘象，使用基于层次分析法的模糊综合评价方法，构建了中国企业国际合作创新收益水平评价模型．结合问卷调查的仓业资料，埘国内企业在图际

期刊

国际合作创新收益水平层次分析法模糊综合评价international collaboration innovation profit level AHP

固体超强酸SO4^2—／TiO2—SiO2催化合成马来酸二辛酯

用H2SO4浸渍钛硅复合氧化物，制得固体超强酸SO4^2-/TiO2-SiO2，考察了催化剂对马来酸酐与正辛醇的酯化反应的催化作用及其制备条件对催化剂活性的影响，并与硫酸，对甲苯磺酸的催化

期刊

固体超强酸SO4^2-/TiO2-SiO2催化合成马来酸二辛酯催化剂SO2-4/TiO2-SiO2solid super acidcatalyst

天然气一煤共气化制备合成气新工艺

天然气一煤共气化新工艺是基于天然气蒸气转化法和煤气化工艺进行耦合发展起来的新型工艺。本文分析了该工艺的技术原理，理论上可以直接制备H2／CO为1～2可调节的合成气；详细地介绍

期刊

天然气一煤共气化新工艺合成气natural gas & coalco-gasificationnew preparation process

乡村振兴背景下乡村工业园区发展探析——以河南为例

国家乡村振兴战略明确提出要发展乡村经济发展片区,而河南省农村地区工业经济方面的发展还远落后于国家平均水平。文章指出,随着综合国力的不断增强,农村地区工业发展基础设

期刊

乡村振兴乡镇企业乡村工业经济乡村产业振兴

阳离子聚丙烯酰胺基复合增强剂对瓦楞原纸增强作用研究

目的探讨CPAM-HPCS-PAE复合增强剂作为增干、湿强剂在瓦楞原纸中的应用效果,并与CPAM增强剂和CPAM/HPCS/PAE混合物比较增强效果。方法将羟丙基壳聚糖（HPCS）、CPAM及PAE树脂通过

期刊

羟丙基壳聚糖CPAMPAE树脂瓦楞原纸复合增强剂

面部神经纤维瘤瘤体出血感染1例

面部神经纤维瘤瘤体出血感染临床较少见,作者遇1例,报告如下。某男,45岁,工人。于1991年4月12日住院,自诉2岁时右侧面部出现肿块,12岁后逐渐加重,1991年4月12日干活中肿块部

期刊

面部神经纤维瘤肿块部位梭形细胞张口受限纤维组织腹部皮肤睑裂换药治疗创口愈合切迹

基于产教融合的《单片机原理及应用》课程教学模式改革研究与实践

本文结合《单片机原理及应用》课程教学中存在的一些问题,提出了基于产教融合的"双平台"教学模式改革的思路和实施方案,通过在实际教学中的运用以及取得的效果,阐释了如何将

期刊

单片机产教融合双平台教学模式

融入CAE技术的力学课程实践教学应用研究

本文概述了武昌工学院城市建设学院力学实践课程的基本情况,介绍了力学实践课程存在的问题,并对出现问题的原因进行分析,从课程考核、实践内容和教学手段三方面提出了力学实

期刊

力学课程实践教学CAE技术Mechanics coursePractical teachingCAE technology

基于CRISPR-Cas9技术构建gpr41基因敲除的RAW264.7细胞系

与本文相关的学术论文