【摘 要】
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目的:研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)MMP-9基因对THP-1细胞增殖的抑制作用。探讨RNA干扰MMP-9基因在白血病治疗中的应用。方法:设计合成针对MMP-9基因的小干扰RNA(small
【机 构】
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蚌埠医学院医学检验系输血学教研室临床检验诊断学实验中心,蚌埠医学院第一附属医院麻醉科,蚌埠医学院医学检验系
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目的:研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)MMP-9基因对THP-1细胞增殖的抑制作用。探讨RNA干扰MMP-9基因在白血病治疗中的应用。方法:设计合成针对MMP-9基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染THP-1细胞,采用RT-PCR法测定MMP-9 mRNA的表达,Western blot测定MMP-9蛋白的表达,MTT和台盼蓝染色观察RNAi后对THP-1细胞生长的影响,显微镜下观察细胞形态改变。结果:siRNA转染组THP-1细胞MMP-9 mRNA及蛋白表达受到抑制,显著低于空白对照组和阴性对照组。MTT及台盼蓝染色结果显示,siRNA组转染后48 h、72 h,THP-1细胞的增殖能力明显下降,细胞生长明显受到抑制,细胞活率明显低于对照组(P<0.05)。倒置显微镜下发现,对照组细胞呈半贴壁生长,细胞轮廓清楚,形态均一,生长旺盛。而siRNA组细胞生长呈受抑制状态,Wright染色后观察,siRNA组细胞形态有明显改变,大部分细胞出现凋亡的形态学变化。结论:靶向MMP-9的siRNA不仅能特异性降低MMP-9 mRNA及蛋白的表达,且能有效抑制THP-1细胞的增殖,促进THP-1细胞凋亡。
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