【摘 要】
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目的探讨miR-133a对肝星状细胞活化和迁移的影响及相关机制。方法培养肝星状细胞HSC-T6,转染miR-133a模拟物,采用qRT-PCR法验证miR-133a转染效果,Transwell法检测细胞迁移能
【基金项目】
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浙江省自然基金(LQ19H030002)
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目的探讨miR-133a对肝星状细胞活化和迁移的影响及相关机制。方法培养肝星状细胞HSC-T6,转染miR-133a模拟物,采用qRT-PCR法验证miR-133a转染效果,Transwell法检测细胞迁移能力,Western blot法测定细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)和表皮生长因子受体(EGFR)蛋白表达水平。采用靶基因预测软件分析miR-133a与EGFR基因结合位点,并用双荧光素酶报告基因实验验证其靶向关系。结果 HSC-T6细胞转染miR-133a模拟物后,与转染模拟物对照相比,miR-133a表达水平显著增加,α-SMA和vimentin蛋白表达显著减少,细胞迁移率显著降低(均P <0.05)。经荧光素酶活性检测和Western blot实验结果显示,miR-133a靶向负调控EGFR表达。EGFR和miR-133a共转染后,与转染miR-133a相比,α-SMA和vimentin蛋白表达上调,细胞迁移率显著增加(P <0.05)。结论上调miR-133a表达可抑制肝星状细胞活化和迁移,其作用机制可能与靶向负调控EGFR表达有关。
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