【摘 要】
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目的 研究黄芪甲苷Ⅳ(Astragaloside Ⅳ,As-Ⅳ)配伍阿魏酸(Ferulic Acid,FA)对顺铂(Csplatin,DDP)诱导损伤的大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的保护作用及其分子机制.方法 SD大鼠BMSCs的分离及培养;通过流式细胞术鉴定BMSCs表面标志物CD34、CD45、CD105、CD44;通过Cell Counting Kit-8试剂盒(CCK8)探究黄芪甲苷、阿魏酸及其配伍对BMSCs增殖的效应以
【机 构】
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广州中医药大学基础医学院,广东广州510006;广州中医药大学基础医学院,广东广州510006;广州中医药大学中西医结合基础研究中心,广东广州510006;广州中医药大学门诊部,广东广州510006;
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目的 研究黄芪甲苷Ⅳ(Astragaloside Ⅳ,As-Ⅳ)配伍阿魏酸(Ferulic Acid,FA)对顺铂(Csplatin,DDP)诱导损伤的大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的保护作用及其分子机制.方法 SD大鼠BMSCs的分离及培养;通过流式细胞术鉴定BMSCs表面标志物CD34、CD45、CD105、CD44;通过Cell Counting Kit-8试剂盒(CCK8)探究黄芪甲苷、阿魏酸及其配伍对BMSCs增殖的效应以及DDP对BMSCs凋亡的影响;通过CCK8法探究黄芪甲苷配伍阿魏酸对顺铂杀伤BMSCs的保护作用;通过ALP染色法探究黄芪甲苷配伍阿魏酸对顺铂杀伤BMSCs后成骨分化的保护效应;通过real-time PCR检测黄芪甲苷配伍阿魏酸干预DDP杀伤后BMSCs后SCF、SDF1和凋亡相关基因BCL2、Caspase3以及PI3K-AKT通路的mRNA表达量;通过Western Blot检测凋亡相关基因BCL2、Caspase3以及PI3K-AKT通路的蛋白相对表达量.结果 流式细胞术结果显示,CD105、CD45阳性率在98％以上且CD34、CD44阴性率小于2％,证明所取细胞是BMSCs.CCK8结果显示As-Ⅳ和FA及其配伍可促进BMSCs的增殖,且可以保护因顺铂诱导损伤的BMSCs.Real-time PCR和Western Blot结果显示黄芪甲苷配伍阿魏酸可通过影响SCF、SDF1、BCL2、Caspase3以及PI3K-AKT的表达从而发挥作用.结论 黄芪甲苷、阿魏酸及其配伍均可促进BMSCs的增殖,且可以保护顺铂诱导损伤后的BSMCs,其作用机制可能调控BMSCs SCF、SDF1的分泌、干预凋亡基因BCL2、Caspase3以及调控PI3K-AKT信号通路的表达有关.
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