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目的：介绍一种新的视网膜Mueller细胞条件化原代培养的方法。方法：使用Con A活化脾细胞培养上清液作为条件化培养基，分别培养人、大鼠、小鼠的视网膜Mueller细胞，并进行形态学观察及免疫组织化学染色。结果：用该方法原代培养不同种类的视网膜Mueller细胞，免疫组织化学染色显示90%以上的视网膜Mueller细胞的神经胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP)和S-100蛋白染色阳性。结论：视网膜Mueller细胞的条件化原代培养是一种可靠的、快速