【摘 要】
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目的：探讨原癌基因c-SKI （cellular Sloan-Kettering Institute）表达变化对血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ）诱导的小鼠高血压性心肌纤维化的影响。方法：将12只雄性C57BL/6小鼠随机分成PBS组（n=6）和Ang Ⅱ组（n=6），利用渗透压微泵皮下植入小鼠慢性持续给予等体积的PBS和Ang Ⅱ，给药4周，测定小鼠血压。取小鼠心脏组织进行
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.81960052）；
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目的：探讨原癌基因c-SKI （cellular Sloan-Kettering Institute）表达变化对血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ）诱导的小鼠高血压性心肌纤维化的影响。方法：将12只雄性C57BL/6小鼠随机分成PBS组（n=6）和Ang Ⅱ组（n=6），利用渗透压微泵皮下植入小鼠慢性持续给予等体积的PBS和Ang Ⅱ，给药4周，测定小鼠血压。取小鼠心脏组织进行HE和Masson染色检测病理学变化；免疫组织化学染色和Western blot检测c-SKI、CD31、平滑肌蛋白22（smooth muscle protein 22, SM22）、Ⅰ型胶原（collagen type Ⅰ, Col Ⅰ）和α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）水平。用不同浓度的AngⅡ处理人冠状动脉内皮细胞（humancoronaryarteryendothelialcells,HCAECs），显微镜观察细胞形态，CCK-8法检测细胞活力；用最低有效剂量的Ang Ⅱ处理HCAECs，免疫荧光染色和Western blot检测c-SKI、CD31、α-SMA、Col Ⅰ和上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）通路蛋白水平。过表达c-SKI和Ang Ⅱ联合处理HCAEC,CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡情况，免疫荧光染色和Western blot检测α-SMA、c-SKI、CD31、Col Ⅰ、EMT通路蛋白和EMT标志因子的表达。结果：Ang Ⅱ处理后小鼠尾动脉收缩压升高，心室壁增厚，Col Ⅰ和α-SMA表达显著上调（P＜0.01）,c-SKI、CD31和SM22表达显著下调（P＜0.01）。10μmol/L Ang Ⅱ处理HCAECs后，细胞连接松散，细胞形态改变，且48 h细胞活力显著降低（P＜0.01）；免疫荧光染色和Western blot结果显示，Ang Ⅱ组Col Ⅰ、α-SMA、Twist、Snail和p-Smad2/3蛋白水平显著升高（P＜0.01）,cSKI和CD31表达显著下调（P＜0.01）。与Ang Ⅱ+vector组相比，过表达c-SKI联合Ang Ⅱ处理显著促进HCAECs活力（P＜0.01），显著抑制细胞凋亡（P＜0.01），显著上调c-SKI、CD31和E-cadherin表达（P＜0.05），显著下调α-SMA、Col Ⅰ、Twist、Snail、p-Smad2/3、N-cadherin和vimentin表达（P＜0.01）。结论：Ang Ⅱ可能通过调控c-SKI表达，促进小鼠高血压性心肌纤维化。
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