【摘 要】
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目的 探讨腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)为载体的含有HBV-S、C或X基因的重组病毒(rAAV-HBV-S,C,X)感染正常人树突状细胞的效率.方法 分别构建含有HBV-S、C和X基因的AAV质粒,在293细胞中包装成重组病毒,测定病毒滴度.从正常人外周血中分离出单核细胞进行体外培养,在培养的第1天分别用rAAV-HBV-S、C、X和作为对照的293细胞裂解液感
【机 构】
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目的 探讨腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)为载体的含有HBV-S、C或X基因的重组病毒(rAAV-HBV-S,C,X)感染正常人树突状细胞的效率.方法 分别构建含有HBV-S、C和X基因的AAV质粒,在293细胞中包装成重组病毒,测定病毒滴度.从正常人外周血中分离出单核细胞进行体外培养,在培养的第1天分别用rAAV-HBV-S、C、X和作为对照的293细胞裂解液感染刺激单核细胞,感染后的单核细胞在GM-CSF、IL-4和TNF-α作用下继续培养7 d获得成熟的树突状细胞.用RT-PCR及流式细胞仪细胞内染色检测HBV基因的RNA和蛋白的表达.结果 重组rAAV-HBV-S、C、X的病毒滴度可以达到107拷贝/ml,用重组病毒分别感染树突状细胞.与对照组相比,感染的树突状细胞可表达相应的HBV基因RNA,流式细胞仪检测显示约90%的树突状细胞有相应HBV蛋白的表达.结论 rAAV-HBV可有效感染树突状细胞,提示可以通过该途径刺激树突状细胞提呈抗原。
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1 干扰素-δ(interferon delta,IFN-δ) 干扰素-δ(interferon delta,IFN-δ)是8～12 d孕期(在子宫植床期)的猪孕体的滋养外胚叶与干扰素-δ共同表达的1型干扰素蛋白质。
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本研究选用人神经胶质瘤细胞U251细胞株作为研究的靶细胞，以细胞形态学改变、细胞超微结构改变以及HCMVLA的表达为指标，研究人类巨细胞病毒（HCMV）是否感染U251细胞，为进一步探讨HCMV致畸机制奠定基础。
1概述 1980年由侯云德编著的"干扰素及其临床应用"一书由江苏人民科技出版社出版以来已经有27年了[1].重组人干扰素自1986年美国FDA及1989年我国SFDA批准投放市场以来也各有21年和18年了,干扰素的基础和临床研究又已取得了较大进展。
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蜱传脑炎是经蜱叮咬而感染蜱传脑炎病毒引起的一类急性传染病.临床上以突发高热及中枢神经系统症状为主要特征,起病急,病死率高,后遗症严重[1].蜱传脑炎也是一种人畜共患病.由于蜱传脑炎病毒种类多,临床症状严重,并且由于此类疾病几乎遍布于世界各大洲,成为国际性的公共卫生问题[1]。
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