多巴胺仿生修饰超顺磁性纳米颗粒对3种细胞的毒性作用

来源 :环境与健康杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jayleardutt
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目的 采用多种方法探讨超顺磁性纳米颗粒(SPIONs)和多巴胺仿生修饰SPIONs(PDA-SPIONs)对人类肺泡基底上皮(A549)细胞、小鼠单核巨噬(RAW 264.7)细胞和大鼠肾上腺嗜铬瘤(PC-12)细胞毒性的影响.方法 将处于对数生长期的A549细胞、RAW 264.7细胞、PC-12细胞分别暴露于终浓度分别为0(对照)~100μg/ml SPIONs和PDA-SPIONs的培养基培养24 h.采用CCK-8法检测细胞活性,检测上清液中LDH的活力以反映细胞膜的完整性,采用普鲁士蓝染色法检测A549细胞内纳米颗粒的分布,并用双荧光报告系统就纳米颗粒引起A549细胞自噬作用进行了探讨.结果 与对照组比较,不同浓度PDA-SPIONs暴露组A549细胞、RAW264.7细胞和PC-12细胞的存活率均下降;且5、10 μg/ml SPIONs暴露组A549细胞及100 μg/ml SPIONs暴露组RAW264.7细胞的存活率也下降,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);而不同浓度SPIONs暴露组PC-12细胞的存活率无明显变化.与相同浓度SPIONs相比,不同浓度PDA-SPIONs暴露组RAW264.7细胞和20、50、100 μg/ml PDA-SPIONs暴露组A549细胞及5、50 μg/ml PDA-SPIONs暴露组PC-12细胞的存活率均下降,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,各浓度PDA-SPIONs暴露组及10、20 μg/ml SPIONs暴露组A549细胞上清液中LDH的活力均较高,差异有统计学意义(P<0.01).与相同浓度SPIONs相比,1、2、10 μg/ml PDA-SPIONs暴露组A549细胞上清液中LDH的活力均较高,差异有统计学意义(P<0.05).普鲁士蓝染色表明,5、10和20μg/ml两种纳米颗粒均进入A549细胞.激光共聚焦观察发现,SPIONs和PDA-SPIONs诱导A549细胞自噬,胞内自噬小体随SPIONs剂量增加而增加.结论 PDA-SPIONs对A549细胞、RAW264.7细胞和PC-12细胞均具有一定的细胞毒性作用,可破坏A549细胞膜的通透性,并引起自噬小体在其胞内积累.
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