【摘 要】
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从提纯病毒抽提基因组RNA,并通过RT-PCR扩增番茄花叶病毒(ToMV)移动蛋白(MP)基因.经克隆测序后插入植物表达载体PBI121的35S启动子下游,通过PCR及酶切筛选分别获取正、反向插
【基金项目】
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浙江省青年科技人才专项基金，教育部跨世纪优秀人才培养计划，高等学校优秀青年教师教学科研奖励计划
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从提纯病毒抽提基因组RNA,并通过RT-PCR扩增番茄花叶病毒(ToMV)移动蛋白(MP)基因.经克隆测序后插入植物表达载体PBI121的35S启动子下游,通过PCR及酶切筛选分别获取正、反向插入的克隆,通过三亲交配导入农杆菌,叶盘转化法转化普通烟草.卡那霉素筛选获得一系列抗性小苗,对其进行PCR检测,Southern、Northern点杂交,Western-blot检测,获得能正义、反义表达ToMV MP基因的转基因植株.
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