【摘 要】
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目的:初步评价马耳他布鲁菌M5疫苗株omp25c基因对其毒力及免疫保护性的影响.方法:利用同源重组的方法,用卡那霉素抗性基因替换M5的omp25c(BMEI1829)基因,得到缺失突变株M5Aom
【机 构】
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军事医学科学院疾病预防控制所,吉林大学公共卫生学院
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目的:初步评价马耳他布鲁菌M5疫苗株omp25c基因对其毒力及免疫保护性的影响.方法:利用同源重组的方法,用卡那霉素抗性基因替换M5的omp25c(BMEI1829)基因,得到缺失突变株M5Aomp25c;分别用M5Aomp25c和M5免疫小鼠,在免疫后不同时间点处死小鼠,通过脾脏细菌计数分析缺失突变株在小鼠体内的毒力,通过检测IgG和IFN-γ的水平分析缺失突变株在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫应答能力,通过攻毒实验评价突变株的免疫保护效果.结果:与M5株相比,M5Aomp25c在小鼠脾脏内的存活时间较短,在第4周时未能检出;M5Aomp25c免疫小鼠诱导产生的IgG水平在第4周达到最高,第6周开始下降;M5Aomp25c免疫小鼠诱导分泌的IFN-γ水平在第4周达到最高为790 pg/mL,第6周时浓度降至530 Pg/mL,整体趋势显著低于阳性对照组;接种了M5Aomp25c的小鼠用布鲁菌强毒株16M攻毒后,免疫保护效果也下降.结论:缺失omp25c的突变株毒力减弱,诱导的体液和细胞免疫水平及免疫保护效果下降,说明omp25c基因是马耳他布鲁菌M5疫苗株的毒力相关基因,对疫苗株M5的免疫应答和免疫保护效果有一定的影响.
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