李斯特细菌hlyA的原核表达与纯化

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目的构建李斯特细菌毒力基因原核表达质粒,并诱导其表达纯化并鉴定目的蛋白。方法构建李斯特溶血素0(ListeriolysinO,LLO)的原核表达载体PGEX/3X,并利用Factor Xa切割了GST标签,酶切正确后构建重组原核表达质粒,并转化到大肠杆菌,IPTG诱导目的蛋白表达并进行Western blot鉴定。结亲目的基因经酶切其结果与预期相符,测序结果显示目的基因GenBank登陆的序列完全一致,重组质粒经IPTG诱导表达相对分子量为60kD的目的蛋白;Western blot鉴定结果显示,重组蛋白
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