PK-15细胞敲除TANK结合激酶1基因促进猪伪狂犬病病毒复制的研究

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lcgbeyong

【摘要】

：

TANK结合激酶1(TBK1)是病毒感染时IRF3、IRF7磷酸化及Ⅰ型干扰素表达的关键酶,在抗病毒天然免疫应答和获得性免疫应答中发挥重要作用。为研究TBK1基因敲除对猪伪狂犬病病毒(P

【作者】

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刘晓贺巴根李坚韩莹倩张爽明胜利杜永坤褚贝贝杨

【机构】

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河南农业大学牧医工程学院

【出处】

：

畜牧兽医学报

【发表日期】

：

2019年6期

【关键词】

：

CRISPR/Cas9 TANK结合激酶1 基因敲除猪伪狂犬病病毒 CRISPR/Cas9TANK-binding kinase 1gene knockout

【基金项目】

：

转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08006001-006),国家自然科学基金(31502031),霍英东教育基金会高等院校青年教师基金(151033),优势特色学科建设经费(203/18xk0102).

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TANK结合激酶1(TBK1)是病毒感染时IRF3、IRF7磷酸化及Ⅰ型干扰素表达的关键酶,在抗病毒天然免疫应答和获得性免疫应答中发挥重要作用。为研究TBK1基因敲除对猪伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响,首先利用CRISPR/Cas9技术构建猪TBK1基因稳定敲除PK-15细胞系,并利用CCK-8检测敲除TBK1对PK-15细胞活力的影响。然后利用流式细胞术检测PRV-GFP荧光强度,用RT-qPCR检测PRV-gB、PRV-gE、PRV-TK、IL-1β、IFN-β和ISG15的转录水平,用Wester

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