【目的】以桉树木屑为原料,筛选适合平菇、毛木耳等常规食用菌菌种的培养基配方,为广西利用桉树木屑制作食用菌菌种提供科学依据。【方法】设3因素3水平正交试验,比较桉树木屑与桑枝屑、棉籽壳的不同配比培养基对平菇、毛木耳菌丝生长的影响及各配方菌种的使用效果。【结果】平菇、毛木耳菌丝在添加不同比例桉树木屑的培养基上均能正常生长,其中在配方b(桉树木屑18.00%、桑枝屑36.00%、棉籽壳36.00%、麸皮7.00%、石灰2.00%、石膏1.00%)、c(桉树木屑12.80%、桑枝屑38.60%、棉籽壳38.60%、麸皮7.00%、石灰2.00%、石膏1.00%)、(f桉树木屑30.00%、桑枝屑45.00%、棉籽壳15.00%、麸皮7.00%、石灰2.00%、石膏1.00%)、(i桉树木屑33.75%、桑枝屑33.75%、棉籽壳22.50%、麸皮7.00%、石灰2.00%、石膏1.00%)培养基上生长速度快,菌丝洁白、粗壮、浓密,转接效果好。【结论】经合理搭配,以桉树木屑作为主料生产平菇、毛木耳菌种完全可行,广西各地可利用桉树木屑和桑枝屑比例较高、棉籽壳较低的配方f和i进行菌种生产,以降低生产成本。