【摘 要】
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高分子量透明质酸(high-molecular-weight hyaluronic acid,HMW-HA)是重要的肝脏基质,分子量高达2×106Da以上,可被活性氧分子(reactive oxygen species,ROS)等降解成低分子
【机 构】
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华中科技大学附属协和医院急诊外科; 华中科技大学同济医学院医学遗传学系; 华中科技大学附属协和医院眼科; 华中科技大学同济医学院免疫学系; 华中科技大学附属协和
【基金项目】
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国家自然科学基金(批准号:30500487和30700792)资助项目
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高分子量透明质酸(high-molecular-weight hyaluronic acid,HMW-HA)是重要的肝脏基质,分子量高达2×106Da以上,可被活性氧分子(reactive oxygen species,ROS)等降解成低分子量透明质酸片段(hyaluronic acid fragments,HA fragments),后者能被toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)识别并激活免疫细胞诱发炎症反应.基于枯否细胞表达TLR4,推测HA fragments通过激活枯否细胞TLR4信号系统而启动肝脏缺血再灌注损伤.从TLR4基因突变型(C3H/HeJ,TLR4Mut/Mut)及野生型(C3H/HeN,TLR4+/+)小鼠分离肝脏枯否细胞常规培养,用酶降解及色谱柱分离方法制备HA fragments,观察HMW-HA及HA fragments激活枯否细胞的差异,检测培养上清肿瘤坏死因子-α或白介素-1β水平变化;枯否细胞p38MAPK信号通路的活化;用特异性p38MAPK阻断剂--SB-203580,阻断p38MAPK活化后,观察培养上清中肿瘤坏死因子-α或白介素-1β水平变化.结果显示HA fragments可以促进TLR4+/+枯否细胞分泌促炎因子,不能诱导TLR4Mut/Mut枯否细胞分泌促炎因子.而HMW-HA既不能促进TLR4+/+枯否细胞也不能促进TLR4Mut/Mut枯否细胞分泌促炎因子.采用多黏菌素中和脂多糖后,HA fragments促进TLR4+/+枯否细胞分泌促炎因子的能力不变,这一过程伴随p38MAPK信号通路的活化.当运用p38MAPK信号通路的特异性阻断剂SB-203580,抑制p38MAPK活性时,HA fragments促进TLR4+/+枯否细胞分泌促炎因子的能力显著下降.因此与基质组成成分HMW-HA不同,HA fragments可以通过TLR4激活枯否细胞,促进其分泌促炎因子诱发炎症反应,这一过程依赖于p38MAPK的激活.
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