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目的
探讨受体相互作用蛋白140(RIP140)过表达对小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞)迁移和增殖的影响。
方法采用脂质体转染法将RIP140过表达质粒导入N2a细胞,经G418筛选出稳定过表达RIP140的细胞系,利用实时定量PCR及Western印迹法对构建的细胞模型进行鉴定;分别采用Transwell小室和活细胞计数试剂盒(CCK)8检测RIP140过表达对N2a细胞迁移和增殖的影响。
结果将RIP140过表达质粒导入N2a细胞,成功构建RIP140过表达的N2a细胞模型N2a–rip140,与N2a细胞相比,N2a–rip140细胞中RIP140 mRNA及蛋白表达量均增高。迁移检测显示N2a细胞迁移数明显高于N2a–rip140细胞[(70±20)个比(5±4)个,P<0.05]。细胞增殖检测显示N2a细胞在24、48、72 h的增殖率分别为1.567±0.107、3.018±0.212、4.112±0.221,而N2a–rip140细胞为1.561±0.281、2.232±0.235、4.025±0.217,两种细胞在3个时间点的增殖率差异均无统计学意义(均P>0.05)。
结论RIP140过表达抑制N2a细胞的迁移行为,但不影响其增殖行为。