【摘 要】
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目的探讨体外稳定诱导骨髓间充质干细胞(BMSC) 分化为成肌纤维细胞和成纤维细胞的方法,为构建组织工程瓣膜提供种子细胞.方法应用Percoll(密度1.073 g/ml)淋巴细胞分离液分离
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目的探讨体外稳定诱导骨髓间充质干细胞(BMSC) 分化为成肌纤维细胞和成纤维细胞的方法,为构建组织工程瓣膜提供种子细胞.方法应用Percoll(密度1.073 g/ml)淋巴细胞分离液分离健康犬骨髓标本,取分离的BMSC,在低糖改良Eagles培养液中培养,并用免疫组织化学的方法做细胞表型鉴定,然后用条件培养基对第2、3代细胞进行诱导分化,并用层黏连蛋白单抗对诱导后的细胞做免疫组织化学鉴定.并对诱导后细胞进行冻存,7 d后复苏观察细胞的生长、增殖及功能.结果经Percoll液分离的骨髓单核细胞,经贴壁培养后,其表型为波形蛋白阳性、α平滑肌肌动蛋白阳性、CD-34、层黏连蛋白阴性;诱导后细胞表达层黏连蛋白,阳性细胞数可达(50±3)%;诱导后BMSC经冻存复苏后,细胞复苏率(85±3)%,复苏后细胞生长、增殖旺盛,功能不受影响.结论BMSC体外能定向诱导分化为成肌纤维细胞和成纤维细胞,并符合种子细胞的要求.
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