小分子蛋白激酶抑制剂对浅表性膀胱癌细胞瘤细胞EGFR下游信号通路的影响

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目的在蛋白水平检测不同靶点的小分子蛋白激酶抑制剂对浅表性膀胱癌细胞中EGFR下游信号通路的影响。方法应用RT-PCR和Western印迹法检测外源基因PTEN、表皮生长因子受体(EGFRwt)、突变型表皮生长因子受体(EGFRvⅢ)在T24派生细胞系中的表达。应用MTT方法检测tarceva对T24派生的四个细胞系的增殖抑制作用。应用Western印迹方法检测小分子蛋白激酶抑制剂tarceva、rapamycin对T24派生细胞系T24-P空、T24-PTEN、T24-EGFRwt、T24-EGFRvⅢEGFR下游信号通路的影响。结果 T24派生细胞系表达稳定;tarceva对EGFR下游信号分子的活性基本无影响;rapamycin可引起ERK和AKT的反馈性活化;rapamycin与tarceva联合应用可完全抑制RPS6的磷酸化。结论单一的小分子蛋白激酶抑制剂tarceva对EGFR下游的信号分子活性的影响不大;tarceva与rapamycin联合应用时可以产生较好的抑制效果。
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