临床分离肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子作用机制的研究

来源 :第二届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学三江论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nolva
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  整合子(integron)是一种能识别并俘获外源性可移动基因,是携带编码抗生素耐药基因盒的DNA片断,具有位点特异性的基因重组系统。研究表明,整合子不仅可介导细菌耐药性群聚,导致多重耐药性的产生,而且可以在不同遗传物质和菌种间转移,引起耐药基因高效快速转移。现已确认4类整合子,但在耐药方面起最主要作用的为第1类整合子。肺炎克雷伯菌是医院分离的最常见的革兰阴性杆菌之一,可引起原发性肺炎,肠炎和脑膜炎(婴儿),泌尿道感染(儿童和成人)及菌血症。近十几年来由该菌引起的免疫低下患者感染或医院感染不断增多,多重耐药菌株也日益日渐增多,治疗该菌引起的感染变得越来越困难,其耐药机制非常复杂。方法用多重聚合酶链反应(mult-PCR)方法检测88株肺炎克雷伯菌临床分离菌株的整合酶基因,对其阳性菌株可变区扩增产物进行测序分析;采用微量稀释法测定14种抗生素对试验菌株的敏感性,对其耐药情况、整合子分布及其结构特征、整合子介导的耐药机制在多重耐药性中的作用进行研究。结果在38株肺炎克雷伯菌DNA上检测到Ⅰ类整合,阳性率43.2%。可变区相关基因盒检测到4种不同片段的PER产物:700bp(8株)、1500 bp(27株)、2200 bp(2株)、2400bp(1株)。1500 bp片段,内部插入氨基糖苷类抗生素的耐药基因(氨基糖苷类核苷转移酶,aadA2),2200 bp片段内部检出dfrA12-orfF-aadA2基因,2400 bp片段,该整合子内部检出dfrA17-orfF-aadA5。对14种抗生素的MIC用多因素的方差分析整合子阳性菌株与阴性菌株耐药情况比较显示,两组比较差异有统计学意义(P<0.01),整合子阴性组抑菌浓度明显低于阳性组。对14种抗生素的MIC用单因素t检验显示:整合子阳性组,庆大霉素(GEN)、阿米卡星(AMK)、抑菌浓度明显高于阴性组,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);亚胺培南、左氧氟沙星、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、头孢西丁、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢唑林、氨苄西林、美罗培南的抑菌浓度与整合子阳性组抑菌浓度相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论目前临床分离的肺炎克雷伯菌耐药性强,并广泛存在Ⅰ类整合子。菌株携带基因盒和耐药表型之间有较好的对应关系,基因盒介导了细菌耐药性。耐药基因盒是整合子阳性菌株对氨基糖苷类的主要原因。
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