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采用RT-PCR技术从分泌抗人血管内皮生长因子受体Ⅱ(kinase insert domain-containing receptor,KDR)基因Ⅲ区单克隆抗体Ycom1D3的杂交瘤细胞中克隆出VH和VL可变区基因,通过重叠延伸拼接(splice-overlap extension)PCR方法在VH和VL基因之间引入柔性短肽(Gly4Ser)3,体外构建Ycom1D3单链抗体基因(Ycom1D3-ScFv),将其克隆至pAYZ表达载体,在大肠杆菌中表达.SDS-PAGE和Western-blot分析结果