【摘 要】
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目的:探究HOXC10通过靶向调控CST1的表达对肺癌细胞干细胞样特性的作用。方法:肺癌细胞系A549在无血清培养条件下形成肿瘤球，WB分别检测HOXC10及干性标志蛋白CD44、CD133、Nanog、SOX2、OCT4的表达。构建ShNC、ShHOXC10 A549细胞，检测干性标志蛋白CD44、CD133、Nanog、SOX2、OCT4的表达，肿瘤成球实验检测细胞自我更新能力，CCK8法检测
【基金项目】
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陕西省自然科学基础研究计划项目，（编号:2018JM7068）；
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目的:探究HOXC10通过靶向调控CST1的表达对肺癌细胞干细胞样特性的作用。方法:肺癌细胞系A549在无血清培养条件下形成肿瘤球，WB分别检测HOXC10及干性标志蛋白CD44、CD133、Nanog、SOX2、OCT4的表达。构建ShNC、ShHOXC10 A549细胞，检测干性标志蛋白CD44、CD133、Nanog、SOX2、OCT4的表达，肿瘤成球实验检测细胞自我更新能力，CCK8法检测细胞增殖能力。构建ShNC、ShHOXC10肺癌小鼠皮下瘤模型，测定肿瘤体积和重量，免疫组织化学法检测HOXC10、CST1和干性蛋白标志蛋白CD44、CD133在肿瘤组织中的表达。q PCR和WB法检测ShNC、ShHOXC10组A549细胞中CST1 mRNA和蛋白表达，ChIP-PCR和ChIP-qPCR检测HOXC10和CST1启动子序列结合，双荧光素酶报告基因验证HOXC10对CST1启动子活性的调控。在ShHOXC10细胞中回补pcDNA3.1-CST1，检测CST1过表达对干性标志蛋白CD44、CD133、Nanog、SOX2、OCT4表达及肿瘤成球和细胞增殖的影响。结果:HOXC10在A549细胞肿瘤球中高表达，敲低HOXC10显著抑制干性蛋白标志CD44、CD133、Nanog、SOX2、OCT4的表达，抑制A549细胞的增殖和肿瘤成球能力，皮下瘤实验显示，敲低HOXC10抑制A549细胞的成瘤能力（P＜0.001），肿瘤重量（P＜0.0001）和体积（P＜0.01）显著降低。HOXC10直接结合CST1上游启动子序列，敲低HOXC10抑制CST1的mRNA及蛋白表达水平，显著抑制CST1启动子活性（P ＜0.01）。在Sh HOXC10细胞中过表达CST1显著上调干性蛋白标志CD44、CD133、Nanog、SOX2、OCT4的表达，增强A549细胞的增殖和肿瘤成球能力。结论:在肺癌细胞中HOXC10通过CST1调控肺癌细胞干细胞样特性。
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