【摘 要】
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旨在解决手工点样斑点杂交中样品点密度小、点样体积受限制和点样点不规整等问题,建立了一种新的点杂交膜预处理方法。首先根据预设点样点的大小、排列方式和密度,制作柱状凸
【机 构】
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湖南农业大学生物科学技术学院,中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良重大科学工程,云南农业大学普洱茶学院
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旨在解决手工点样斑点杂交中样品点密度小、点样体积受限制和点样点不规整等问题,建立了一种新的点杂交膜预处理方法。首先根据预设点样点的大小、排列方式和密度,制作柱状凸起模具;其次将模具固定于杂交膜上,使模具凸起部位与膜紧密接触;再将熔化的石蜡涂布于膜上非模具接触部位,待石蜡凝固后移走模具,获得预处理杂交膜。以荧光染料IRDye800标记的抗体为样品进行直接点样检测,同时提取水稻、小麦和大豆的蛋白进行点杂交实验验证。结果显示,利用上述方法得到非点样部位具有疏水性的预处理NC膜和PVDF膜,其点样点位置、形状和大
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