【摘 要】
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目的对大鼠的心肌微血管内皮细胞（myocardial microvascular endothelial cells，MMVECs）离体培养方法进行改良，建立该细胞的缺氧模型。方法取出7日龄左右的Wistar大鼠的心脏，用胰
【机 构】
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中国医学科学院/北京协和医学院北京协和医院,中国医学科学院/北京协和医学院基础医学研究所细胞中心
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目的对大鼠的心肌微血管内皮细胞（myocardial microvascular endothelial cells，MMVECs）离体培养方法进行改良，建立该细胞的缺氧模型。方法取出7日龄左右的Wistar大鼠的心脏，用胰蛋白酶和胶原酶二次消化法获得MMVECs，密度梯度离心法纯化细胞，计算细胞纯度；用免疫细胞化学方法检测微血管内皮细胞特异性第Ⅷ因子、CD34及CD31相关抗原；将原代培养的细胞置于持续通人体积分数为1％O2、5％CO2和94％N2的自制缺氧装置中，并在37℃孵箱中分别缺氧处理4、6、1
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