【摘 要】
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目的 研究SARS冠状病毒棘突蛋白受体结合部位S1的免疫原性,为SARS的实验诊断和新型疫苗的研究提供依据.方法用克隆有哺乳动物细胞密码子优化的SARS-CoV S1基因的质粒pcDNA3.1/S1或P-S1Ig 转染293 T细胞,用细胞的上清液纯化S1蛋白.以pcDNA3.1/S1质粒对BALB/c小鼠进行2次基因免疫,以纯化的S1蛋白进行加强免疫.用ELISA法检测小鼠抗SARS-CoV的特
【机 构】
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100005,北京,中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病原室,100005,北京,中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病原室,中国医学科学院血液病研究所,美国哈佛
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目的 研究SARS冠状病毒棘突蛋白受体结合部位S1的免疫原性,为SARS的实验诊断和新型疫苗的研究提供依据.方法用克隆有哺乳动物细胞密码子优化的SARS-CoV S1基因的质粒pcDNA3.1/S1或P-S1Ig 转染293 T细胞,用细胞的上清液纯化S1蛋白.以pcDNA3.1/S1质粒对BALB/c小鼠进行2次基因免疫,以纯化的S1蛋白进行加强免疫.用ELISA法检测小鼠抗SARS-CoV的特异性IgG抗体,并在Vero E6细胞上做体外中和实验,检测中和抗体.结果 S1蛋白诱导小鼠产生抗SARS-CoV的特异性抗体;1∶1 499.68稀释的S1蛋白免疫的小鼠血清可保护50%的细胞对1 000 TCID50的病毒攻击,而阴性对照血清不能保护细胞对病毒的感染.结论 SARS冠状病毒棘突蛋白受体结合部位S1能有效诱导机体产生具有高效保护作用的中和抗体免疫反应,可望发展成为理想的SARS棘突蛋白亚单位疫苗。
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