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目的 构建GM-CSF基因重组腺病毒穿梭载体并探讨XbaⅠ甲基化位点在构建中的应用，为构建GM-CSF基因重组腺病毒及更方便地利用XbaⅠ多克隆位点打下基础。方法体外分离小鼠脾细胞，经ConA刺激，用含两种不同的XbaⅠ位点毗邻碱基的引物RT-PCR获取小鼠GM-CSF基因，经XbaⅠ及XbaⅠ双酶切后分别定向克隆人pAdTrack-CMV重组腺病毒穿梭载体中。比较两种重组载体酶切鉴定的效率并通过测序验证。结果 成功逆转录得到小鼠GM-CSF基因并克隆人pAdTrack-CMV中，测序结果与预期一致。酶切