【摘 要】
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用PCR技术从桔青霉基因组DNA反转录扩增得到木聚糖酶编码基因xyl,并构建基因表达载体p PAL7-xyl重组质粒,转化受体菌E.coli BL21进行原核表达分析。IPTG诱导6 h酶活性达到最
【机 构】
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沧州师范学院生命科学学院,中国农业科学研究院作物科学研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程/生物质能源研究中心
【基金项目】
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公益性行业(农业)科研专项(编号:201503135-16);河北省科技计划(编号:16273306)
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用PCR技术从桔青霉基因组DNA反转录扩增得到木聚糖酶编码基因xyl,并构建基因表达载体p PAL7-xyl重组质粒,转化受体菌E.coli BL21进行原核表达分析。IPTG诱导6 h酶活性达到最高,为2.07 IU/m L;表达产物进行SDS-PAGE电泳分析,在22 ku处呈现蛋白条带,与理论的蛋白大小相一致,37℃条件下诱导6 h蛋白表达量最高;同时进行构建基因表达载体p PIC9K-xyl重组质粒,转化受体菌毕赤酵母GS115作真核表达分析,经甲醇诱导96 h后酶活性达到最高,为23.84 IU
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