【摘 要】
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目的 研究棕榈酸对大鼠胰腺腺泡细胞的损伤作用及内质网应激通路的作用.方法 采用胶原酶法体外分离大鼠胰腺腺泡细胞.将胰腺腺泡细胞与0.05和0.1 mmol/L棕榈酸分别共育1、2、
【机 构】
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上海交通大学附属上海市第一人民医院消化科
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目的 研究棕榈酸对大鼠胰腺腺泡细胞的损伤作用及内质网应激通路的作用.方法 采用胶原酶法体外分离大鼠胰腺腺泡细胞.将胰腺腺泡细胞与0.05和0.1 mmol/L棕榈酸分别共育1、2、3 h后,以未加棕榈酸的细胞为对照组,分别给予胆囊收缩素八肽(CCK-8)刺激,测定细胞淀粉酶释放比例;共聚焦显微镜动态观察胰腺腺泡细胞内钙离子浓度变化;透射电镜观察胰腺腺泡细胞凋亡;RT-PCR检测胰腺腺泡细胞内质网应激过程重要分子GRP78/Bip、XBP-1、GADD153/CHOP和caspase-12的基因表达.结果 体外分离的胰腺腺泡细胞与棕榈酸共同培育,给予100 pmol/L CCK-8刺激30 min后细胞淀粉酶释放比例随培育时间和棕榈酸浓度的增加而增加,且明显高于对照组(P＜0.05);细胞与0.1 mmol/L棕榈酸共同培育3 h,给予100 pmol/L CCK-8刺激后,可检测到GRP78/Bip、GADD153/CHOP、分裂的XBP-1和caspase-12的mRNA表达.透射电镜下观察到相应的胰腺腺泡细胞凋亡.细胞与0.1 mmol/L棕榈酸共同培育2、3 h后,分别给予100 pmol/L CCK-8刺激,发现细胞内钙荧光强度维持的高水平,较对照组明显增加(P＜0.05).结论 棕榈酸可增高大鼠胰腺腺泡细胞对CCK-8的敏感性,通过升高细胞内钙离子的浓度诱发内质网应激,从而引起细胞凋亡,加重胰腺腺泡细胞损伤.
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